目的:研究慢性阻塞性肺疾�。–OPD）大鼠模型骨骼肌萎縮中肌細(xì)胞凋亡的參與情況,并通過測定幾種關(guān)鍵的Caspase蛋白酶的表達(dá)來推斷可能的凋亡信號傳導(dǎo)途徑。方法:通過被動(dòng)吸煙和氣道注射豬胰彈性蛋白酶（PPE）建立COPD大鼠模型。從體重基本正常的COPD陽性大鼠中隨機(jī)選取18只為COPD營養(yǎng)正常組（B組）,從體重明顯較輕的COPD陽性大鼠中隨機(jī)選取18只COPD營養(yǎng)不良組（C組）,另外選18只正常大鼠做為對照組進(jìn)行研究。取三組大鼠的趾長伸肌和膈肌分別做成病理標(biāo)本,用TdT介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記（TUNEL）法和免疫組化法分別測定DNA碎片和評價(jià)Caspase-3、-8、-9在這些標(biāo)本中的活性表達(dá)。結(jié)果:用TUNEL法和Caspase-3免疫組化法測得的COPD營養(yǎng)不良組大鼠模型骨骼肌細(xì)胞的凋亡率分別是53.9%和44.4%,兩種檢測方法有較好的一致性（r=0.923）;趾長伸肌重量是骨骼肌萎縮的一個(gè)穩(wěn)定的指標(biāo),其與凋亡率呈明顯的負(fù)相關(guān)（r=-0.89）;Caspase-8、-9僅在COPD營養(yǎng)不良組大鼠肌細(xì)胞中明顯表達(dá),在趾長伸肌中的Caspase-8的平均光密度（AOD）和積分光密度（I... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英漢縮略詞對照表
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 主要試劑和儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)用溶液的配制
    2.2 研究對象
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物編號
        2.2.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 大鼠COPD模型建立
        2.3.2 COPD模型組大鼠營養(yǎng)不良的判斷
        2.3.3 模型組成模后分組
        2.3.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死
        2.3.5 肺功能的測定
        2.3.6 病理標(biāo)本的制備和保存
        2.3.7 標(biāo)本的病理學(xué)檢測
        2.3.8 骨骼肌細(xì)胞凋亡率測定
        2.3.9 骨骼肌細(xì)胞Caspase蛋白酶表達(dá)
        2.3.10 Caspase-3、-8、-9觀察和分析
    2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 結(jié)果
    1.模型評價(jià)
        1.1.大鼠一般情況
        1.2.大鼠肺組織、氣道病理改變(見本章附圖一)
        1.3.肺功能
        1.4 骨骼肌病理變化(見本章附圖二)
    2.大鼠體重變化
    3.趾長伸肌重量變化
    4.骨骼肌凋亡率測定
        4.1 實(shí)驗(yàn)大鼠膈肌、趾長伸肌凋亡率
        4.2 平均凋亡率與體重相關(guān)性分析
        4.3 趾長伸肌凋亡率與趾長伸肌重量相關(guān)性分析
        4.4 膈肌凋亡率與趾長伸肌凋亡率的關(guān)系
    5.Caspase-3表達(dá)
        5.1 實(shí)驗(yàn)大鼠膈肌、趾長伸肌Caspase-3細(xì)胞核染色分析
        5.2 膈肌、趾長伸肌Caspase-3陽性細(xì)胞核比率相關(guān)性分析
        5.3 Caspase-3陽性細(xì)胞核比率與TUNEL檢測的凋亡率相關(guān)性分析
    6.Caspase-8、-9表達(dá)
        6.1 一般結(jié)果
        6.2 膈肌與趾長伸肌切片Caspase-8免疫組化染色光密度對比分析
        6.3 膈肌與趾長伸肌切片Caspase-9免疫組化染色光密度對比分析
    附圖一 實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織病理學(xué)圖片
    附圖二 實(shí)驗(yàn)大鼠骨骼肌病理圖片
    附圖三 COPD營養(yǎng)不良組Caspase免疫組化圖片
    附圖四 實(shí)驗(yàn)大鼠骨骼肌凋亡圖片
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述:骨骼肌萎縮中凋亡現(xiàn)象與機(jī)制
    1.細(xì)胞凋亡的途徑
        1.1 死亡受體及配體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的激活
        1.2 線粒體路徑
        1.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑
    2.骨骼肌細(xì)胞凋亡的研究
        2.1 廢用引起的骨骼肌萎縮中的凋亡
        2.2 去神經(jīng)支配骨骼肌萎縮中的凋亡
        2.3 引起骨骼肌凋亡的其它原因
    3.小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間主要研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3259082