下呼吸道感染常見致病菌基因診斷的研究
發(fā)布時間:2021-06-16 22:08
目的:根據(jù)DNA分子堿基互補配對的原理和不同來源、具有互補序列的單鏈DNA在一定條件下可以形成異源雙鏈DNA的特性,建立了一種利用病原菌特異長鏈DNA探針直接檢測生物素標(biāo)記細(xì)菌DNA的斑點雜交技術(shù),以快速檢測下呼吸道感染的常見致病菌。并將該方法應(yīng)用于臨床痰樣本的檢測,同時與痰培養(yǎng)和聚合酶鏈反應(yīng)方法進(jìn)行比較,探討該方法在下呼吸道感染診斷中的應(yīng)用價值。方法:1.選擇肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌、甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌、甲氧西林敏感表皮葡萄球菌、甲氧西林耐藥表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯桿菌、大腸埃希菌、嗜肺軍團(tuán)菌這10種下呼吸道感染最常見的病原菌,作為檢測菌株。在這10種病原菌高度特異的基因序列內(nèi)利用聚合酶鏈反應(yīng)合成上述10種細(xì)菌特異的長鏈DNA探針,并將合成的特異探針固定在硝酸纖維素膜上,與用長臂光敏生物素標(biāo)記后的模板DNA進(jìn)行斑點雜交反應(yīng),通過觀察雜交信號判斷存在何種細(xì)菌感染,同時研究該方法的敏感性和特異性。2.利用上述斑點雜交方法檢測100份社區(qū)獲得性肺炎患者、150份醫(yī)院獲得性肺炎患者和50份非下呼吸道感染患者的痰標(biāo)本,觀察其檢測結(jié)果,并與培養(yǎng)法...
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞對照表(Abbreviation Index)
中文摘要(Abstract in Chinese)
英文摘要(Abstract in English)
前言(Introduction)
第一部分 斑點雜交的實驗研究
材料(Materials)
方法(Methods)
結(jié)果(Results)
第二部分 斑點雜交的臨床應(yīng)用研究
材料(Materials)
方法(Methods)
結(jié)果(Results)
討論(Discussion)
結(jié)論(Conclusion)
研究意義和展望(Significance and Prospects)
參考文獻(xiàn)(References)
綜述(Review)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文(Published paper)
致謝(Acknowledgements)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]第二屆全國細(xì)菌耐藥性與抗感染化療藥物臨床應(yīng)用學(xué)術(shù)會議紀(jì)要[J]. 佘丹陽,袁桂清. 中華醫(yī)學(xué)雜志. 2003(05)
[2]中國醫(yī)院和社區(qū)獲得性感染革蘭陽性球菌耐藥性監(jiān)測研究[J]. 李家泰,李耘,王進(jìn). 中華醫(yī)學(xué)雜志. 2003(05)
[3]中國重癥監(jiān)護(hù)病房革蘭陰性菌耐藥性連續(xù)7年監(jiān)測研究[J]. 陳民鈞,王輝. 中華醫(yī)學(xué)雜志. 2003(05)
[4]探針的純化與否對基因芯片重復(fù)利用的影響[J]. 張寶,馬文麗,石嶸,吳清華,鄭文嶺. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2002(03)
[5]下呼吸道感染診斷治療進(jìn)展[J]. 何禮賢. 中國醫(yī)師雜志. 2001(07)
[6]我國肺部感染研究現(xiàn)狀與思考[J]. 何禮賢,鄧偉吾. 中華結(jié)核和呼吸雜志. 2001(06)
[7]PCR結(jié)合寡核苷酸探針雜交檢測臨床常見真菌的實驗研究[J]. 黃媛,牟兆欽,陳建魁,尹秀云. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2001(03)
[8]長臂光敏基因探針對結(jié)核性漿膜腔積液的診斷價值[J]. 王衛(wèi)華,肖紅,肖勇,符志軍. 中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志. 2001(02)
[9]rDNA探針雜交檢測病人痰標(biāo)本中結(jié)核桿菌的研究[J]. 張靈霞,莊玉輝,楊華衛(wèi),李邦印,夏湘萱. 中國防癆雜志. 2000(03)
[10]兩種DNA探針雜交檢測結(jié)核分支桿菌方法的研究[J]. 楊華衛(wèi),楊樹德,莊玉輝,李國利,李邦印. 微生物學(xué)報. 2000(02)
本文編號:3233879
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞對照表(Abbreviation Index)
中文摘要(Abstract in Chinese)
英文摘要(Abstract in English)
前言(Introduction)
第一部分 斑點雜交的實驗研究
材料(Materials)
方法(Methods)
結(jié)果(Results)
第二部分 斑點雜交的臨床應(yīng)用研究
材料(Materials)
方法(Methods)
結(jié)果(Results)
討論(Discussion)
結(jié)論(Conclusion)
研究意義和展望(Significance and Prospects)
參考文獻(xiàn)(References)
綜述(Review)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文(Published paper)
致謝(Acknowledgements)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]第二屆全國細(xì)菌耐藥性與抗感染化療藥物臨床應(yīng)用學(xué)術(shù)會議紀(jì)要[J]. 佘丹陽,袁桂清. 中華醫(yī)學(xué)雜志. 2003(05)
[2]中國醫(yī)院和社區(qū)獲得性感染革蘭陽性球菌耐藥性監(jiān)測研究[J]. 李家泰,李耘,王進(jìn). 中華醫(yī)學(xué)雜志. 2003(05)
[3]中國重癥監(jiān)護(hù)病房革蘭陰性菌耐藥性連續(xù)7年監(jiān)測研究[J]. 陳民鈞,王輝. 中華醫(yī)學(xué)雜志. 2003(05)
[4]探針的純化與否對基因芯片重復(fù)利用的影響[J]. 張寶,馬文麗,石嶸,吳清華,鄭文嶺. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2002(03)
[5]下呼吸道感染診斷治療進(jìn)展[J]. 何禮賢. 中國醫(yī)師雜志. 2001(07)
[6]我國肺部感染研究現(xiàn)狀與思考[J]. 何禮賢,鄧偉吾. 中華結(jié)核和呼吸雜志. 2001(06)
[7]PCR結(jié)合寡核苷酸探針雜交檢測臨床常見真菌的實驗研究[J]. 黃媛,牟兆欽,陳建魁,尹秀云. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2001(03)
[8]長臂光敏基因探針對結(jié)核性漿膜腔積液的診斷價值[J]. 王衛(wèi)華,肖紅,肖勇,符志軍. 中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志. 2001(02)
[9]rDNA探針雜交檢測病人痰標(biāo)本中結(jié)核桿菌的研究[J]. 張靈霞,莊玉輝,楊華衛(wèi),李邦印,夏湘萱. 中國防癆雜志. 2000(03)
[10]兩種DNA探針雜交檢測結(jié)核分支桿菌方法的研究[J]. 楊華衛(wèi),楊樹德,莊玉輝,李國利,李邦印. 微生物學(xué)報. 2000(02)
本文編號:3233879
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