目的探討miR-29b對脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞系A(chǔ)549凋亡的影響及其機制。方法將體外培養(yǎng)的A549細(xì)胞分為對照組、LPS組（給予10 mg/L的LPS處理）、LPS+miR-NC組（轉(zhuǎn)染miR-29b mimics陰性對照后給予LPS處理）、LPS+miR-29b組（轉(zhuǎn)染miR-29b mimics后給予LPS處理）;用RT-qPCR檢測細(xì)胞中miR-29b的表達(dá)水平;MTT法檢測細(xì)胞存活率;流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率;Western blot檢測Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白的表達(dá);雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測Bax和miR-29b的靶向關(guān)系。結(jié)果與對照組相比,LPS組、LPS+miR-NC組和LPS+miR-29b組細(xì)胞中miR-29b、Bcl-2蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞存活率均明顯降低,而細(xì)胞凋亡率和Bax、cleaved caspase-3蛋白的表達(dá)水平均明顯升高（P<0.05）;與LPS組相比,LPS+miR-29b組細(xì)胞中miR-29b、Bcl-2蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞存活率均明顯升高,而細(xì)胞凋亡率和Bax、cleaved caspas... 

【文章來源】：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2020,40(06)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞及試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)、分組與處理:
        1.2.2 RT-qPCR檢測miR-29b的表達(dá):
        1.2.3 MTT法檢測細(xì)胞存活率:
        1.2.4 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率:
        1.2.5 Western blot檢測Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白的表達(dá):
        1.2.6 雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 轉(zhuǎn)染后A549細(xì)胞中miR-29b表達(dá)升高
    2.2 miR-29b過表達(dá)對A549細(xì)胞活力的影響
    2.3 miR-29b過表達(dá)對A549細(xì)胞凋亡的影響
    2.4 miR-29b過表達(dá)對A549細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    2.5 miR-29b靶基因的預(yù)測及其驗證
3 討論



本文編號：3162518