本文關(guān)鍵詞：溶血磷脂酸在內(nèi)皮祖細(xì)胞移殖治療急性肺損傷大鼠中的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目標(biāo)：探討LPS引發(fā)的大鼠急性肺損傷(acute lung injury ALI),給予經(jīng)溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid, LPA)預(yù)處理內(nèi)皮祖細(xì)胞移殖治療的效果,探究LPA對EPCs的存活及遷移活性的改善作用,提高EPCs移殖治療ALI的效果,為生物學(xué)提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。方法：制建ALI模型,選用密度梯度的離心方法,單核細(xì)胞,經(jīng)SD大鼠的骨髓中分離,得到內(nèi)皮祖細(xì)胞,用DMEM-F12培養(yǎng)基(含20%優(yōu)良胎牛血清及生長因子)誘導(dǎo)培育；體外分離、培養(yǎng)的內(nèi)皮祖細(xì)胞,經(jīng)LPA預(yù)處理,察看EPCs的增值活性在體外受LPA影響情況。進(jìn)一步,經(jīng)LPA過夜處理EPCs后,LPS誘導(dǎo)尾靜脈注射的內(nèi)皮祖細(xì)胞移殖,LPS+熒光標(biāo)記的內(nèi)皮祖細(xì)胞懸液,注入急性肺損傷模型大鼠體內(nèi),觀察經(jīng)LPA處理后的內(nèi)皮祖細(xì)胞的移殖,治療大鼠急性肺損傷的作用。大鼠隨機(jī)分為4組：正常對照組、LPS對照組(LPS+PBS組)、內(nèi)皮祖細(xì)胞對照組(LPS+EPCs組)、治療組(LPS+EPCs+LPA組),大鼠ALI模型的建制,LPS誘導(dǎo),方法靜脈給藥,LPS+內(nèi)皮祖細(xì)胞移殖組,熒光標(biāo)識的EPCs懸液(EPCs2×106/0.5ml),注入靜脈于ALI模型中,治療組(LPS+EPCs+LPA組)經(jīng)LPA預(yù)處理的EPCs注射于ALI模型大鼠尾靜脈。分別于移殖后1、7天取肺組織,選用HE染色評價病理改變；肺組織的干/濕比值(W/D)檢測,選用實(shí)時熒光PCR方法,檢測TLR4mRNA、NF-KBmRNA的表達(dá)情況,在肺組織中。結(jié)果：成功分離、培養(yǎng)EPCs；LPA能夠促進(jìn)EPCs的增殖, EPCs移植ALI大鼠結(jié)果顯示,EPCs移殖可減輕急性肺損傷大鼠肺炎癥細(xì)胞的浸潤、細(xì)胞損傷,降低組織的W/D比值；EPCs經(jīng)LPA預(yù)處理,大鼠外周血中內(nèi)皮祖細(xì)胞的含量可顯著提高；同時TLR4 mRNA、 NF-KBmRNA的表達(dá)在肺組織被下調(diào),LPA預(yù)處理EPCs組相比單純EPCs移殖組明顯減少炎癥細(xì)胞在急性肺損傷大鼠肺結(jié)構(gòu)的浸潤、細(xì)胞損傷,下降肺組織的W/D比值；TLR4 mRNA、 NF-KBmRNA的表達(dá)在肺組織被下調(diào)(p0.001)。 結(jié)論：1、選用密度梯度的離心方法,經(jīng)大鼠的骨髓分離,培育了EPCs在體外；2、LPA預(yù)處理EPCs靜脈移殖后能成功到達(dá)損傷大鼠的肺組織。3.LPA預(yù)處理EPCs移殖可緩解LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷,修復(fù)了損傷的血管從而通過減少炎性細(xì)胞滲出和粘附,減輕了炎癥應(yīng)答；通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞,下調(diào)了促炎癥反應(yīng)的應(yīng)答,使機(jī)體恢復(fù)促炎一抗炎平衡。4.LPA促使EPCs增殖抗其凋亡,明顯減緩LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷,改善預(yù)后,為急性肺損傷治療提供了新的思路。
【關(guān)鍵詞】：溶血磷脂酸 內(nèi)皮祖細(xì)胞 大鼠 急性肺損傷
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R563
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• ~.略詞表9-11
• 引言11-19
• 參考文獻(xiàn)14-19
• 1. 材料與方法19-26
• 1.1 材料19-20
• 1.2 方法20-26
• 2. 結(jié)果26-38
• 2.1 內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離培養(yǎng)26
• 2.2 LPA預(yù)處理內(nèi)皮祖細(xì)胞26-28
• 2.3 溶血磷脂酸預(yù)處理內(nèi)皮祖細(xì)胞移殖治療急性肺損傷大鼠實(shí)驗(yàn)28-29
• 2.4.Real-time PCR 方法，檢測 NF-kB mRNA 及 TLR4mRNA 表達(dá)29-34
• 2.5 流式細(xì)胞儀檢測外周血中EPCs的含量34-38
• 3. 討論38-43
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 結(jié)論49-50
• 文獻(xiàn)綜述50-56
• 參考文獻(xiàn)53-56
• 致謝56-57
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文57

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：316091