急性肺損傷（acute lung injury,ALI）是伴有嚴重呼吸功能障礙的一個復雜多變的過程。治療和減輕ALI對機體的損害,降低死亡率,一直是醫(yī)學界研究的熱點。目前在傳統(tǒng)的ALI治療基礎之上,對ALI的基因治療也取得了一些進展。適合于ALI基因治療的目的基因分為抗氧化劑編碼基因、抗炎基因、保護和維持肺泡上皮細胞和內皮細胞功能的基因、抑制ARDS纖維化增生的基因等幾類。在這幾類基因中,保護和維持肺泡上皮細胞和內皮細胞功能的基因,是對損傷的肺泡上皮細胞的修復起關鍵作用的基因,而修復損傷的肺泡上皮細胞又是ALI救治的重點之一。但由于在ALI發(fā)生時,肺泡上皮細胞不僅僅是單純的結構功能損傷,還伴有嚴重的凋亡現象,因此,對肺泡上皮細胞在ALI時的修復涉及到細胞結構功能的修復和肺泡上皮細胞的再生。肺間質細胞對正常肺泡上皮細胞的組織形成和對ALI時上皮細胞損傷的修復都具有重要作用。許多由間質細胞產生的細胞因子都可作為調節(jié)上皮細胞增生和分化的信號分子,其中角質細胞生長因子（keratinocyte growth factor,KGF）是最重要的因子之一。KGF不僅是上皮細胞的絲裂原,也是促進肺泡上... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市

【文章頁數】：91 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

-1一步法RT-PCR檢測正常小鼠肺組織KGFR和KGF存在情況

第三軍醫(yī)大學碩士學位論文法 RT-PCR 檢測 LPS 作用后小鼠肺組織和 A549 細胞的 KGFR 表達用小鼠肺和 A549 細胞后，小鼠肺組織于 3、24、48、72h，A54h 分別提取 mRNA 進行 RT-PCR 檢測。發(fā)現 KGFR 表達隨著 L降趨勢，通過 Bio-Rad 凝膠成像軟件進行半定量分析，以標）為統(tǒng)計指標，顯示小鼠肺組織各實驗組與對照組之間以及有顯著差異（P<0.01）。A549 細胞除了 24h 組與對照組比較有，其余各組與對照組比較以及它們相互間比較都沒有明顯差異-2 和表 1-1）1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

40 cycles標準曲線制作[20]及熒光定量方法的 KGFR 進行 PCR 擴增，擴增產物經純化后測依照拷貝數將此擴增產物稀釋為 103、104、105、1濃度梯度為標準進行 FQ-PCR，PE5700 熒光定量。每一次循環(huán)，PE5700 熒光定量 PCR 儀計數一值并通過標準曲線計算出樣本的拷貝數。理±s 表示，各組間比較采用計量資料的 t 檢驗。定 KGFR 標準曲線[20]小鼠肺組織進行RT-PCR獲得正常KGFR的DNA 103、104、105、106四個濃度梯度作為四個標準對數作標準曲線圖。（見圖 1-3-1）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]用熒光定量PCR方法檢測轉染細胞中外源基因的拷貝數[J]. 李影,何蘊韶,程剛,李虎.  中山醫(yī)科大學學報. 2001(01)



本文編號：3136425