目的:研究轉化生長因子β1 （TGF-β1）和干擾素-γ（IFN-γ）對氣道上皮細胞結締組織生長因子（CTGF）表達的調控作用及其信號轉導途徑。方法:原代培養(yǎng)新西蘭兔氣道上皮細胞,待細胞生長融合成片（細胞生長第5天）進行以下實驗:（1）實驗1:將培養(yǎng)細胞隨機分為8組,4個實驗組加入終濃度為10ng/ml的TGF-β1,4個對照組加入等量無血清培養(yǎng)液,然后分別于6h、12h、24h、36h收集細胞,用免疫細胞化學法檢測各組氣道上皮細胞CTGF蛋白表達水平;（2）實驗2:將培養(yǎng)細胞隨機分為4組,3個實驗組分別加入不同濃度的TGF-β1 （1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml）,對照組加入等量無血清培養(yǎng)液,用免疫細胞化學法檢測各組氣道上皮細胞CTGF蛋白表達水平,用原位雜交法檢測各組氣道上皮細胞Smad7 mRNA表達水平;（3）實驗3:將培養(yǎng)細胞隨機分為4組,3個實驗組加入終濃度為10ng/ml的TGF-β1的同時分別加入不同濃度的IFN-γ（10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml）,對照組加入等量TGF-β1的同時加入等量無血清培養(yǎng)液,用免疫細胞化學法檢測各組氣道上皮細胞C... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

正常氣道上皮細胞細胞生長第2天×200

正常氣道上皮細胞細胞生長第5天×200

正常氣道上皮細胞細胞生長第7天×200

【參考文獻】：
期刊論文
[1]TGFβ1對轉染Smad4/Smad7基因的大鼠系膜細胞Ⅰ、Ⅳ型膠原表達的影響[J]. 楊琛,戴璐,黃瑾,劉學光,陳琦,張秀榮,郭慕依.  復旦學報(醫(yī)學版). 2004(02)
[2]哮喘大鼠氣道上皮CTGF表達及其與氣道重構關系的研究[J]. 劉國祥,張雷,黃英.  第三軍醫(yī)大學學報. 2003(20)
[3]胰酶冷消化加刮刷法分離培養(yǎng)氣管上皮細胞的實驗研究[J]. 杜永成,許建英,延峰.  中國病理生理雜志. 2003(09)



本文編號：3004787