肺結(jié)核病是一種古老的疾病,是由肺結(jié)核分枝桿菌引發(fā)的呼吸系統(tǒng)傳染性疾病。肺結(jié)核分枝桿菌可潛伏性、持續(xù)性傳播,不易被免疫系統(tǒng)識別,并具有高耐藥特性。肺結(jié)核分枝桿菌為胞內(nèi)菌,能夠躲避免疫系統(tǒng)攻擊殺傷,從而可以長時間在宿主體內(nèi)潛伏生存。當(dāng)機體免疫系統(tǒng)功能下降時,潛伏在宿主細胞內(nèi)的肺結(jié)核分枝桿菌大量爆發(fā),繼而引起嚴重的肺部炎性疾病,影響人類的健康。研究肺結(jié)核分枝桿菌侵染宿主后躲避免疫系統(tǒng)攻擊的機制,對于闡明肺結(jié)核病發(fā)病機制及研發(fā)新型抗肺結(jié)核藥物具有重大意義。為了解析肺結(jié)核分枝桿菌的免疫逃避機制,本論文以恥垢分枝桿菌細胞全裂解物(whole cell lysis,WCL)為研究對象,研究全裂解物與宿主免疫系統(tǒng)早期相互作用的免疫學(xué)特征指標,為后續(xù)逐級分析全裂解物的免疫效應(yīng)成分,最終確定免疫效應(yīng)分子奠定基礎(chǔ)。目的:探究恥垢分枝桿菌細胞全裂解物對細菌在宿主肺部清除速率的影響及對宿主早期免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用模式的探究。方法:本論文通過氣溶膠發(fā)生方法優(yōu)化小鼠模型,模擬肺結(jié)核分枝桿菌通過呼吸系統(tǒng)感染人體的過程。利用與肺結(jié)核分枝桿菌具有高度相似性并且無致病性的恥垢分枝桿菌作為模擬菌,將容易被機體快速識別并全部清除的非致病性的大腸桿菌作為對照細菌,比較大腸桿菌與恥垢分枝桿菌兩種細菌在小鼠肺部清除速率的差異;用恥垢分枝桿菌細胞全裂解物保護大腸桿菌后,研究其在宿主體內(nèi)清除速率的改變及宿主免疫系統(tǒng)應(yīng)答方式的改變;對比恥垢分枝桿菌細胞全裂解物和大腸桿菌細胞全裂解物單獨作用于宿主所產(chǎn)生的免疫系統(tǒng)應(yīng)答方式的改變,進一步驗證恥垢分枝桿菌細胞全裂解物對宿主免疫系統(tǒng)的特殊作用模式。通過細菌計數(shù)統(tǒng)計(CFU)計算對比細菌在體內(nèi)清除速率及差異,小鼠肺組織切片HE染色研究免疫病理學(xué)改變,酶聯(lián)吸附免疫測定(ELISA)檢測小鼠肺部免疫因子IFN-γ和IL-10的表達,細胞因子微球檢測技術(shù)(CBA)檢測小鼠體液免疫因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、TNF、IFN-γ的表達。結(jié)果:(1)恥垢分枝桿菌在小鼠肺部的清除速率低于大腸桿菌;在14h時大腸桿菌清除完畢,恥垢分枝桿菌尚未完全清除,因此14h為差異最明顯階段,所以以取樣到14h作為早期免疫反應(yīng)研究的基礎(chǔ);用恥垢分枝桿菌細胞全裂解物保護大腸桿菌后,大腸桿菌在宿主體內(nèi)的清除速率降低,恥垢分枝桿菌細胞全裂解物保護后的大腸桿菌14h時在體內(nèi)尚未清除完畢。(2)HE染色免疫病理學(xué)結(jié)果顯示大腸桿菌組引起免疫細胞聚集程度大于恥垢分枝桿菌組及恥垢分枝桿菌細胞全裂解物保護后的大腸桿菌組,差異顯著(P0.05);大腸桿菌細胞全裂解物引起免疫細胞聚集程度亦大于恥垢分枝桿菌細胞全裂解物組,兩者差異極顯著(P0.01)。(3)ELISA檢測恥垢分枝桿菌感染小鼠肺部后,肺部屬促炎因子的IFN-γ分泌低于大腸桿菌感染組,而與IFN-γ相互拮抗的抑炎因子IL-10分泌高于大腸桿菌感染組(P0.05),恥垢分枝桿菌細胞全裂解物保護大腸桿菌后引起肺部促炎因子IFN-γ分泌程度隨清除時間增加而逐漸降低,而肺部抑炎因子IL-10分泌程度隨清除時間增加而逐漸升高;恥垢分枝桿菌細胞全裂解物感染引發(fā)促炎因子IFN-γ分泌低于大腸桿菌細胞全裂解物感染組,而肺部抑炎因子IL-10分泌高于大腸桿菌細胞全裂解物感染組(P0.05)。(4)CBA檢測結(jié)果顯示,恥垢分枝桿菌感染宿主后分泌屬Th1型細胞亞群的促炎免疫細胞因子IFN-γ、IL-17和TNF低于大腸桿菌感染組,然而與Th1型免疫因子相互拮抗的Th2型細胞亞群的抑炎因子IL-4、IL-10分泌高于大腸桿菌感染組(P0.05);恥垢分枝桿菌細胞全裂解物保護大腸桿菌后引起宿主抑炎因子IL-4分泌增加(P0.05);恥垢分枝桿菌細胞全裂解物單獨作用機體引發(fā)分泌抑炎因子IL-10明顯高于大腸桿菌細胞全裂解物感染組(P0.01)。結(jié)論:恥垢分枝桿菌細胞全裂解物是導(dǎo)致恥垢分枝桿菌清除速率低、不易被機體所清除的主要因素。其機制可能是通過降低宿主免疫系統(tǒng)炎性攻擊,降低Th1型免疫細胞對細菌的攻擊,增加Th2型細胞因子分泌從而抑制Th1型細胞因子的分泌,進而為細菌可以在宿主體內(nèi)長時間存活提供有利條件。
【學(xué)位單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R521

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 沈萬森,孫華文;胃癌腫瘤裂解物修飾的樹突狀細胞體外誘導(dǎo)抗原特異性細胞毒T淋巴細胞[J];臨床外科雜志;2004年08期

2 張茜;金亮;李柏青;沙泉;;結(jié)核桿菌全菌裂解物和全脂質(zhì)抗原對人外周血單個核細胞的作用[J];免疫學(xué)雜志;2014年06期

3 陳如明,謝明星,高學(xué)運,劉瑞田,劉玉星,蔚成芳;中藥與病變組織裂解物復(fù)方預(yù)防雞傳染性法氏囊病的效果觀察[J];中國獸醫(yī)雜志;1996年08期

4 樓曉;汪勁松;靳繼德;何梓銘;吳祖澤;郭子寬;;血小板裂解物支持人骨髓基質(zhì)細胞的擴增[J];組織工程與重建外科雜志;2009年02期

5 昝義全，黃安模，唐莉佳;氟里昂－11裂解物急性中毒患者尿氟排泄規(guī)律的觀察[J];環(huán)境與健康雜志;1995年06期

6 賈英,黃裕,唐良萏;負載宮頸癌腫瘤裂解物的樹突狀細胞誘導(dǎo)的淋巴細胞反應(yīng)[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2004年04期

7 劉文英;張勝強;盛龍生;安登魁;;唑啉頭孢菌素中間體(裂解物)的高效液相色譜分析[J];南京藥學(xué)院學(xué)報;1983年01期

8 王振檁;崔力爭;;聚四氟乙烯熱裂解物對健康的影響[J];職業(yè)與健康;2007年19期

9 袁麗;高瑞昌;薛長湖;郝淑賢;于剛;;褐藻酸鈉裂解物提高凡納濱對蝦保水性機理的研究[J];水產(chǎn)學(xué)報;2011年10期

10 古濤,朱一蓓,李敏,黃勇,席泓,于葛華,戴俊,顧宗江,張學(xué)光;腫瘤細胞凍融裂解物上清對凋亡細胞負載的樹突狀細胞生物學(xué)特性的作用研究[J];中國病理生理雜志;2003年03期

相關(guān)會議論文 前2條

1 孫煥;劉金明;孫帥;宋震宇;石耀軍;陸珂;李浩;金亞美;林矯矯;;東方田鼠肝臟裂解物篩選日本血吸蟲成蟲噬菌體展示cDNA文庫[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會成立大會暨第一次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

2 梁健;郭大偉;姜曉峰;王學(xué)范;魏云濤;姜洪磊;;基因修飾與腫瘤裂解物負載致敏樹突狀細胞誘導(dǎo)抗肝癌效應(yīng)的比較[A];第十二屆全國肝癌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 徐亞楠;恥垢分枝桿菌細胞全裂解物抵御宿主免疫清除作用研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2017年

2 張茜;結(jié)核桿菌全菌裂解物和全脂質(zhì)抗原對人外周血單個核細胞活化和增殖的作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

3 楊曉蕾;腸道菌裂解物對間充質(zhì)干細胞及其天然免疫受體的影響[D];暨南大學(xué);2015年

本文編號：2825047