【摘要】： 目的:體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, MSCs),將培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)尾靜脈注入用豬胰彈性蛋白酶制作的大鼠肺氣腫模型體內(nèi),4周后測動脈血?dú)?觀察肺組織病理學(xué)變化,以探討MSCs對肺氣腫的治療作用,為今后臨床治療肺氣腫探求一種新的方法。 方法:Wistar大鼠24只,體重250±10g,隨機(jī)分為4組,每組6只,分別為健康組(A組)、模型組(B組)、生理鹽水對照組(C組)和治療組(D組)。B、C和D組均利用氣管內(nèi)一次性滴注豬胰彈性蛋白酶(PPE)的方法(劑量2u/g)制作大鼠肺氣腫動物模型,A組用相同的方法以生理鹽水為對照。4周后肺氣腫動物模型制成。利用密度梯度離心與貼壁法相結(jié)合的方法分離、培養(yǎng)大鼠MSCs,并進(jìn)行體外擴(kuò)增。傳到第三代時,MSCs的細(xì)胞活力最佳,用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測MSCs表面CD71的表達(dá)。用溴氮胞苷(BrdU)對MSCs進(jìn)行體外標(biāo)記,采用同種異體移植,通過尾靜脈注射于D組肺氣腫大鼠體內(nèi),約2.0×106/只,C組用相同的方法給予生理鹽水。 結(jié)果:4周后測動脈血?dú)?代表肺功能;取肺組織作病理切片,觀察肺泡變化,進(jìn)行肺泡計數(shù),并計算單位面積平均肺泡數(shù)和平均肺泡面積,觀察肺組織病理改變。結(jié)果顯示:A、B、C、D四組兩兩比較,動脈血?dú)?PH值、PO2和PCO2)均無明顯差異(P0.05);平均肺泡數(shù)和平均肺泡面積均有明顯差異:D組大鼠單位面積平均肺泡數(shù)組明顯高于B組(P0.001)和C組(P=0.02),但低于A組(P0.001);A、D組平均肺泡面積無明顯差異(P=0.128),B、C組之間無明顯差異(P=0.186),D組平均肺泡面積明顯低于B組(P0.001)和C組(P=0.015)。 結(jié)論:經(jīng)尾靜脈注射MSCs治療的大鼠肺氣腫模型的肺泡數(shù)雖然低于健康組,但與鹽水對照組和模型組相比明顯增加,平均肺泡面積明顯減小。說明MSCs使大鼠實(shí)驗性肺氣腫的病理變化發(fā)生了逆轉(zhuǎn)。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R563.3

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本文編號：2713337