端粒酶活性的測定在鑒別良、惡性胸腔積液中價值的研究
發(fā)布時間:2020-06-03 13:27
【摘要】: 目的研究端粒酶在良、惡性胸腔積液中的表達,尋找鑒別良、惡性胸腔積液的輔助檢測方法。方法用端粒重復序列擴增法(TRAP)檢測20例惡性胸腔積液和19例良性胸腔積液中端粒酶的表達,分析良、惡性胸腔積液端粒酶表達的差異,并進一步比較其中肺癌及肺結(jié)核患者胸腔積液中端粒酶活性的區(qū)別。數(shù)據(jù)用SPSS軟件處理,兩樣本率的比較用四格表資料的確切概率法,P0.05為有顯著性差異。結(jié)果⑴20例惡性胸水脫落細胞中端粒酶活性檢測陽性者9例,陰性11例,端粒酶活性陽性表達率為45%;19例良性胸水脫落細胞中4例端粒酶活性陽性表達,15例陰性,端粒酶活性陽性表達率為21.1%;4例TRAP檢測陽性患者中肺結(jié)核患者2例且強陽性表達,另外2例為肺炎旁胸腔積液;經(jīng)統(tǒng)計學分析良、惡性胸腔積液患者間端粒酶活性表達無顯著的差異。⑵惡性胸水中17例為肺癌患者,端粒酶活性檢測當中8例呈陽性表達,9例陰性,端粒酶陽性表達率為47%;12例肺結(jié)核胸水脫落細胞中端粒酶活性檢測陽性患者2例,陰性患者10例,端粒酶活性的陽性表達率為16.7%;肺癌組與肺結(jié)核組端粒酶活性表達無顯著的差異。結(jié)論⑴端粒酶并非是惡性腫瘤的特異性標志,而只是一種增殖指標。⑵目前還不能以端粒酶為標志物鑒別診斷良、惡性胸腔積液。
【圖文】:
后高滲裂解方法從細胞或組織中提取端粒酶。酶的作用下將加入的原料 dNTP 連接到 TS 引物上,使端粒重于端粒酶重復序列的引物 RP,用 PCR 擴增端粒酶的延伸產(chǎn)物烯酰胺凝膠電泳,不同片段的端粒酶產(chǎn)物會在膠片上產(chǎn)生不預處理刺術(shù)抽取新鮮胸水 lOOml,將新鮮胸水置于 4℃下自然0ml,離心(4℃,1200r/min,10 分鐘),棄上清,離心血性胸水,細胞沉淀加入 5 ml Gey 溶液混勻,作用),棄上清,,保存細胞團。明顯的血性胸水常需重復作的原則,采用 Primer-Primers 5.0 軟件設(shè)計出端粒酶
8 9 10 11 12附圖 1 肺癌端粒酶的聚丙烯酰胺凝膠電泳圖1、12:DNA 分子量標準物;2、3:陽性對照細胞;4:培養(yǎng)的肺癌細胞株;5、6、7:肺癌胸水脫落細胞;8:肺結(jié)核胸水脫落細胞;9:正常淋巴細胞;10:肺癌支氣管肺泡灌洗液;11:陰性對照Fig 1 The polyacrylamide gel electrophoresis oflung cancer telomerase in pleural effusion1,12: DNA marker; 2,3:positive control cells; 4:lung cancer cell line; 5,6,7: pleural effusion cells of lungcancer;8: pleura
【學位授予單位】:寧夏醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2005
【分類號】:R561
本文編號:2694892
【圖文】:
后高滲裂解方法從細胞或組織中提取端粒酶。酶的作用下將加入的原料 dNTP 連接到 TS 引物上,使端粒重于端粒酶重復序列的引物 RP,用 PCR 擴增端粒酶的延伸產(chǎn)物烯酰胺凝膠電泳,不同片段的端粒酶產(chǎn)物會在膠片上產(chǎn)生不預處理刺術(shù)抽取新鮮胸水 lOOml,將新鮮胸水置于 4℃下自然0ml,離心(4℃,1200r/min,10 分鐘),棄上清,離心血性胸水,細胞沉淀加入 5 ml Gey 溶液混勻,作用),棄上清,,保存細胞團。明顯的血性胸水常需重復作的原則,采用 Primer-Primers 5.0 軟件設(shè)計出端粒酶
8 9 10 11 12附圖 1 肺癌端粒酶的聚丙烯酰胺凝膠電泳圖1、12:DNA 分子量標準物;2、3:陽性對照細胞;4:培養(yǎng)的肺癌細胞株;5、6、7:肺癌胸水脫落細胞;8:肺結(jié)核胸水脫落細胞;9:正常淋巴細胞;10:肺癌支氣管肺泡灌洗液;11:陰性對照Fig 1 The polyacrylamide gel electrophoresis oflung cancer telomerase in pleural effusion1,12: DNA marker; 2,3:positive control cells; 4:lung cancer cell line; 5,6,7: pleural effusion cells of lungcancer;8: pleura
【學位授予單位】:寧夏醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2005
【分類號】:R561
【參考文獻】
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1 劉瑾,楊青,蘭亞佳,王綿珍;肺癌患者端粒酶表達的meta分析[J];中國肺癌雜志;2001年04期
2 陳娟,張錦;流式細胞術(shù)DNA含量分析對肺癌診斷的價值[J];中國肺癌雜志;2003年05期
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本文編號:2694892
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