【摘要】： 目的：ATⅡ是肺泡上皮的干細(xì)胞，參與肺生長發(fā)育、損傷修復(fù)過程。大量 研究表明ATⅡ與肺纖維化關(guān)系密切，且在纖維化過程中具有重要作用。近 年來，尤其在生理和病理情況下與肺的非呼吸功能頗為被人關(guān)注。本實(shí)驗(yàn) 通過對建立BLM致大鼠肺纖維化模型和BLM處理體外培養(yǎng)的ATⅡ，觀 察BLM肺損傷大鼠肺組織中ATⅡ的形態(tài)結(jié)構(gòu)、增殖活性的變化以及PS 定性、定量分析的方法，研究BLM肺損傷早期ATⅡ增殖活性變化規(guī)律及 對損傷的肺泡上皮細(xì)胞修復(fù)功能的影響，為探討ATⅡ在肺間質(zhì)纖維化發(fā)生 中的地位和作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：BLM氣管內(nèi)滴注（4mg.ml~(-1)，5mg.kg~(-1)）制作大鼠肺損傷模型分為3、7、 14、28d組，對照組在同樣條件下氣管內(nèi)注入相同數(shù)量的生理鹽水，方法 同實(shí)驗(yàn)組。分別行肺組織標(biāo)本釕紅電鏡組織化學(xué)染色、利用高效液相色譜 （HPLC）法、分光光度計(jì)法分別測定支氣管肺泡灌洗液（BALF）中PL 及其組分和蛋白質(zhì)，，流式細(xì)胞儀測定BLM處理的體外培養(yǎng)的ATⅡ細(xì)胞增 殖周期，并作對照分析。 結(jié)果：（1）對照組PS層呈連續(xù)、均勻一致內(nèi)襯于肺泡腔的電子致密帶。AT Ⅱ結(jié)構(gòu)完整、清晰。實(shí)驗(yàn)組各組均可見PS層喪失連續(xù)、均勻絨狀結(jié)構(gòu)， 脫落入肺泡腔或聚集成塊現(xiàn)象或散落于肺泡腔內(nèi)，其中以3d組較為明顯。 釕紅陽性表面層的厚度與對照組比較，3d組較厚，且染色深，7、14d組 ＄·f4L44＋ttk4 一 無明顯差別，28 d組較淡薄。BALF的PS中 PL總量均趨向于增加。PL組 分中磷脂酞甘油（PG）含量3d組升高，7、14、28 d組降低。磷脂酞肌醇 （PI）含量變化則與此相反。PG／PI比值在3 d組升高，7、14、28 d組降 低。注藥后7、14、28 d組P＊們降低（＜o(jì)WX 與對照組比較有顯著性差 異。（2）3、7 d組可見 AT 11變性壞死，甚至崩解，胞質(zhì)內(nèi)容物脫落入肺泡 腔，以 3 d組較明顯。3 d組 AT 11板層小體體積數(shù)目減少，板層小體部分 或完全空泡化，板層不規(guī)則且變薄，并可見肺泡腔散在脫落的板層小體。7d 組板層小體開始數(shù)目增多，體積增大，以 14、28 d組較為顯著，并可見部 分巨大板層小體。AT 11增生各組均可見，以 7 d組較明顯。板層小體 3 d 組數(shù)量減少，并呈空泡狀。7 d組開始增多，以 14、28 d組較為明顯。（3） 3、7d組基底膜水腫、裸露，甚至斷裂，使血管腔和肺泡腔相通或直接暴 露于肺泡腔內(nèi)，并有炎性細(xì)胞和間隔中的成纖維細(xì)胞等滲出到肺泡腔內(nèi)。 14、28 d組也可見斷裂基底膜被沉著的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）、纖維素樣物 質(zhì)包埋于其中，14 d組可見有 AT 11轉(zhuǎn)化為 ATI，并逐漸伸展、粘附于裸 露基底膜。（4）PS中蛋白質(zhì)的含量，3 d組明顯增高以后逐漸下降，28 d 組接近對照組。u）BLM處理的AT 11 GJG；期比例第id明顯下降，第2 d 開始逐漸上升，第sd接近對照組水平。死亡細(xì)胞（包括凋亡細(xì)胞）第id 開始增多，第Zd出現(xiàn)高峰，然后逐漸減少，但第sd仍未達(dá)到對照組水平。 結(jié)論：（）BLM肺損傷早期可導(dǎo)致 AT 11細(xì)胞的結(jié)構(gòu)及功能的改變，降低 AT 11細(xì)胞的修復(fù)能力。（2）BLM肺損傷早期 AT 11具有一定的增殖、分化 修復(fù)能力，且逐漸增強(qiáng)。（3）PS中磷脂及其組分，尤其 PG和與肺損傷及 肺纖維化嚴(yán)重程度相關(guān)。（4）蛋白質(zhì)含量與肺泡炎癥程度呈正相關(guān)，可作 為肺損傷早期損傷和炎癥的敏感指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號】：R965;R560.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2692171