【摘要】：目的①動態(tài)檢測慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)各發(fā)展階段肺組織氣道、肺動脈重構的進展。②了解核因子-κB(the nuclear factor-κB,NF-κB)在COPD各階段動態(tài)變化情況,以及NF-κB與氣道、肺血管重構的關系。③觀察NF-κB抑制劑吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)對COPD各發(fā)展階段肺組織氣道、肺動脈重構的影響,分析藥物的防治效果。 方法將48只雄性SD大鼠隨機分為八個組,分別納入實驗組及藥物干預組,每組6只。實驗組為:A、B、C、D。正常對照組(A):正常飼養(yǎng)4周;慢支組(B):于實驗第1、14天經氣道內注入脂多糖(lipopolysaccharide , LPS),200μg/次,4周后檢測;COPD組(C):第1、14天經氣道內注入LPS,200μg/次,熏香煙1h/天,共4周;COPD并肺動脈高壓組(D):第1、14天經氣道內注入LPS,200μg/次,熏香煙1h/天,共6周,實驗的最后兩周在熏香煙的同時,給予18%低氧8 h/天。PDTC藥物干預組為:A1(空白對照組)、B1(慢支干預組)、C1(COPD干預組)、D1(COPD并肺動脈高壓干預組)。動物模型制作同各對應組,從第3周起給各藥物干預組腹腔注射PDTC,劑量100mg·kg-1·d-1。A1組從第三周起腹腔注射同PDTC劑量相同的生理鹽水。各組測定氣道阻力、肺血流動力學和右心室肥厚指數,分別對肺組織行HE染色和三聯染色,觀測氣道炎癥,氣道重構以及肺小動脈的病理形態(tài)學改變。用免疫組化法檢測各組肺組織中NF-κB蛋白的表達,用RT-PCR、Western Blot分別檢測各組肺組織勻漿中NF-κB mRNA和NF-κB蛋白的表達情況。 結果①與A組相比,C、D組氣道阻力明顯增大(P 0.05)。②C、D組右心室收縮壓(right ventricular systolic pressure,RVSP)平均肺動脈壓力(mean pulmonary arterial pressure,mPAP)和右心室游離壁/左心室+室間隔(the ratio of the weight of right ventricle/left ventricle and septum,RV/LV+S)都明顯高于A組(P 0.05)。D組RVSP高于C組(P 0.05)。C組與D組間RV/LV+S差異無意義(P 0.05)。C1與C組、D1與D組比較RVSP、mPAP值降低(P 0.05)。D1組的RV/LV+S值較D組降低(P 0.05)。③與A組比較,C、D組氣道重構指標細支氣管管壁厚度與氣管外徑比值(MT%)、管壁面積和氣管總面積比值(MA%)均明顯增高(P 0.05)。C、D組間MT%、MA%無差異(P 0.05)。C1組與C組,D1組與D組比較,細支氣管MT%、MA%均下降(P 0.05)。④肺血管重構分析提示,與A組相比,C、D組肌化型動脈百分比增多(P 0.05),但C組尚未出現肺血管壁的增厚(P 0.05);D組肺小動脈管壁厚度與血管外徑比值(WT%)、管壁面積與血管總面積比值(WA%)比值增大(P 0.05),說明出現明顯的肺血管重構。與各實驗組相比,C1、D1組肌化型動脈百分比降低(P 0.05),非肌化型動脈百分比增高(P 0.05)。D1組較D組WT%、WA%比值有所減小(P 0.05)。⑤免疫組化結果顯示,C、D組NF-κB蛋白表達強于A組(P 0.05),C1、D1組較實驗組C、D組NF-κB蛋白含量下降(P 0.05)。⑥RT-PCR結果說明,與A組相比,C、D組NF-κB mRNA表達增強(P 0.05),C組與D組間NF-κB mRNA表達也有差異(P 0.05)。C1組較C組、D1組較D組NF-κB mRNA表達減弱(P 0.05)。⑦Western Blot電泳結果顯示,與A組相比,C、D組NF-κB蛋白表達明顯增強(P 0.05),D組較C組NF-κB蛋白表達增強(P 0.05)。C1組較C組、D1組較D組NF-κB蛋白表達明顯較弱(P 0.05)。⑧NF-κB的表達與氣道重構指標MT%、MA%,肺血管重構指標WT%、WA%均呈正相關(P 0.01)。 結論①COPD早期已出現肺血流動力學變化,隨疾病進展逐漸出現進行性加重的肺血管、氣道重構。表現為肺腺泡內肌化型動脈百分比增高、肌化型動脈管壁增厚;氣道阻力增加、肺內小氣道平滑肌層增厚。②隨COPD病程進展,可檢測到肺組織內NF-κB的表達增強,NF-κB的表達水平與氣道、肺血管重構有一定相關性。③藥物干預組與實驗組對比,PDTC可抑制NF-κB的表達,部分改善氣道、肺動脈重構。
【圖文】：

C、D 組氣道阻力明顯增大（P <0.05）。B 組、C 組大（P <0.05）。說明隨著疾病的進展，氣道阻力有逐，，圖 1。表 1 實驗組各組氣道阻力比較___________________________________________________組別 例數 氣道阻力(kpa)___________________________________________________A 6 0.3750±0.0522B 6 0.3883±0.0408㤘C 6 0.5167±0.0480 #㤘D 6 0.6083±0.0736 #____________________________________________________# 與 A 組相比 P <0.05，㤘 與 D 組相比 P <0.05

_____________________________________________________________組別 例數 RVSP（mmhg） mPAP（mmhg）_____________________________________________________________A 6 27.03±2.30 22.07±1.85B 6 29.23±2.69 & 24.21±2.71 &C 6 35.32±3.80 # & 29.65±3.63 #D 6 42.34±5.62 # 34.61±5.80 #A1 6 26.45±2.15 22.54±2.10B1 6 29.05±4.81 23.89±3.53C1 6 29.53±4.20 * 24.41±1.91 *D1 6 29.96±5.45 * 25.51±2.61 *____________________________________________________________ 組比較 P <0.05，& 與 D 組比較 P <0.05，* 與各對應實驗組比較 P
【學位授予單位】：桂林醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R563.9

【參考文獻】

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本文編號：2670236