發(fā)布時間：2020-05-12 07:38

【摘要】： 目的：觀察白細胞介素32(Interleukin-32, IL-32)在博來霉素(bleomycin, BLM)誘導的小鼠肺纖維化過程中各期的表達和糖皮質激素治療后其表達的變化,探討IL-32在肺纖維化發(fā)病機制中的作用及意義。 方法：將72只體重為20-22g的雄性小鼠隨機分為對照組、實驗組和治療組,每組24只。對照組給予0.9%氯化鈉注射液0.04ml,實驗組和治療組給予0.04ml的BLM(5mg/kg)一次性氣管內灌注用以復制肺纖維化模型,治療組在BLM灌注后每天給予地塞米松(dexamethasone, DM)5mg/kg腹腔注射。然后各組分別于第3、7、14和28天各處死6只小鼠,取肺組織,做病理切片、免疫組織化學染色,應用Western Blot法測定IL-32表達。 結果：對照組的小鼠肺組織病理學檢查改變輕微,炎性細胞浸潤少,肺泡炎性滲出少見,肺泡間隔無增厚,無成纖維細胞的增殖,沒有明顯的肺纖維化性改變。實驗組肺組織病理切片按時間順序呈現(xiàn)由肺泡炎至纖維化動態(tài)改變,早期肺泡炎性滲出較重,肺泡間隔有大量的炎性細胞浸潤。中晚期可見炎性滲出逐漸減輕,肺泡萎陷、消失,大小不等,肺泡間隔逐漸增厚,成纖維細胞大量增殖；實驗組的肺泡炎和肺纖維化評分均高于對照組和治療組,有統(tǒng)計學意義(P0.05)；治療組病理學檢查也按時間順序呈現(xiàn)由肺泡炎到肺纖維化的動態(tài)改變,但肺泡炎和肺纖維化的程度較實驗組輕。免疫組織化學檢測顯示IL-32在對照組僅有少量的表達,主要在肺泡壁上表達,實驗組顯示IL-32的表達在第7、14天明顯增高,第28天明顯降低,主要在肺泡壁上皮細胞、巨噬細胞、中性粒細胞、淋巴細胞和肺泡腔的滲出液中表達,治療組的表達相對較輕,但仍高于對照組。應用Western Blot法測定IL-32蛋白的表達顯示,對照組僅有少量的表達,各個時間點沒有明顯的差異(P0.05),實驗組中IL-32蛋白表達從第3天開始高于對照組和治療組,第14天達到高峰,第28天降低,但仍較對照組和治療組高(P0.01)。組內各個時間點除了第3天與第28天相比沒有統(tǒng)計學差異外(P0.05),其余均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；治療組也呈現(xiàn)類似的趨勢,但比實驗組的表達明顯減輕,有顯著的統(tǒng)計學意義(P0.01)。 結論：IL-32在肺纖維化形成過程中存在高表達,可能在肺纖維化形成的早中期發(fā)揮重要作用；地塞米松對肺纖維化的早期具有一定的治療作用。
【圖文】：

天更加明顯，部分肺泡萎陷消失。IL一犯主要在肺泡上皮細胞、巨噬細胞、中性粒細胞、細支氣管上皮細胞中表達，陽性細胞呈棕褐色顆粒狀，成纖維細胞l一掃表達lL一32較弱;治療組(圖2.F一I)也呈現(xiàn)類似的變化順序，與實驗組相比，染色明顯減輕，且肺泡炎和纖維化的程度較實驗組輕。

江蘇大學碩士學位論文實驗組、治療組和對照組的 westernblofting法檢測IL一32蛋白的表達(圖3、4和表6)治療組對照組實驗組IL一32旦一aetin圖3肺纖維化過程中各組小鼠肺組織中IL一32蛋白印跡 Fig.3TheexPressionsofIL一 2ProteinineaehgrouPbyWesternBlotting注:p一actin為內參組別表 6IL一2蛋白表達情況比較(x士s，n=6):Tab· 6TheeomParisonofIL一32ProteinexPressions第3天第7天第14天第28天治療組6 0.232士 o.o22ab0.363士0.021”b 0.571士0.021”b 0.303士0.0科”b實驗組60667士 o.ol7ab0.591士0.022“b 0.977士0.013“bO，678士0.012”b對照組6 0.162士 0.0210.163士0.020 0.169士0.030 0.160士0.023注:實驗組與同一天對照組和治療組比較，“P<0.01;除實驗組第3天與第28天IL一32表達相比外0.05，同組不同天IL一32表達之間兩兩相比，，bP<0.ol。
【學位授予單位】：江蘇大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R563

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本文編號：2659883