【摘要】：研究背景：哮喘是一種復(fù)雜的多基因疾病,由易感基因和環(huán)境因素共同作用決定。自1996年通過全基因掃描發(fā)現(xiàn)第一個哮喘連鎖位點以來,目前已發(fā)現(xiàn)了數(shù)百個與哮喘相關(guān)的基因。FLG基因是近幾年新發(fā)現(xiàn)的一個與哮喘相關(guān)的基因,其突變位點與哮喘的關(guān)聯(lián)在不同種族人群中存在較大的差異。而FLG突變3321delA、K4022X與漢族人群支氣管哮喘的發(fā)生,及其與哮喘患者肺功能、血清嗜酸性粒細(xì)胞的關(guān)系尚未有相關(guān)研究。 研究目的：研究FLG基因突變與支氣管哮喘的發(fā)生是否具有相關(guān)性。 方法：采用病例-對照研究,收集散發(fā)支氣管哮喘患者90例,健康對照者100例,根據(jù)詢問既往有無特應(yīng)性皮炎(atopic disease, AD)病史,將哮喘組分為無AD病史組及有AD病史組；并對哮喘患者進(jìn)行肺功能檢測,及血清嗜酸性粒細(xì)胞(eosinophils, EOS)檢測。所有研究對象均抽取外周靜脈全血,提取全血細(xì)胞基因組DNA作研究對象,用PCR擴增FLG基因的兩個突變位點(3321delA、K4022X)后進(jìn)行直接測序。應(yīng)用SPSS(13.0)軟件包對檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析：應(yīng)用t檢驗檢測組間年齡是否均衡；應(yīng)用χ2檢驗檢測組間性別是否平衡；各組3321delA、K4022X等位基因頻率及基因型頻率的比較采用Pearson's檢驗或Fisher's檢驗(當(dāng)n≥40但有1≤T5時,或當(dāng)n40,或T1時)；對所選取的樣本采用χ2檢驗檢測Hardy-Weinberg遺傳平衡度；應(yīng)用SHEsis軟件對3321delA、K4022X位點進(jìn)行連鎖不平衡分析；并對兩個位點進(jìn)行LD檢驗,構(gòu)建單體型進(jìn)行檢驗以分析單體型在不同組間的差異。定義P0.05時具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1.3321delA和K4022X不同基因型及等位基因在哮喘組與健康對照組中,其頻率分布兩組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。 2.3321delA和K4022X不同基因型及等位基因在合并AD哮喘組與健康對照組、合并AD哮喘組與無AD哮喘組中,其頻率分布兩組比較均無統(tǒng)計學(xué)差異。 3.3321delA和K4022X不同基因型及等位基因在哮喘嗜酸性細(xì)胞增高組與健康對照組、哮喘嗜酸性細(xì)胞增高組與哮喘嗜酸性細(xì)胞正常組中,其頻率分布兩組比較均無統(tǒng)計學(xué)差異。 4.3321delA和K4022X不同基因型及等位基因在哮喘肺功能異常組與健康對照組、哮喘肺功能異常組與哮喘肺功能正常組中,其頻率分布兩組比較均無統(tǒng)計學(xué)差異。 5.健康對照組基因型頻率符合Hardy-Weinberg平衡,具有良好的群體代表性。 6.3321delA、K4022X存在弱連鎖不平衡。 7.對3321delA和K4022X進(jìn)行單倍型分析,2條單倍體不傳遞。 結(jié)論： 1.FLG基因突變3321delA、K4022X與支氣管哮喘的發(fā)生可能無相關(guān)性； 2.FLG基因突變3321delA、K4022X與合并AD病史哮喘的發(fā)生可能無相關(guān)性。 3.FLG基因突變3321delA、K4022X與哮喘患者肺功能受損、嗜酸性粒細(xì)胞升高可能無相關(guān)性。
【圖文】：

(filagsrin)的無活性前體—絲聚合蛋白原(profilaggrin)，主要在表皮、子宮內(nèi)膜、口腔及鼻粘膜等膜組織中表達(dá)【’2一，“]。FLG包含三個外顯子[’“]，其中外顯子1和外顯子2均不編碼蛋白質(zhì)，外顯子3編碼大部分蛋白質(zhì)(見圖1一1)。FLG由N一端S一100鈣離子結(jié)合區(qū)、B結(jié)構(gòu)域、N一端截短FLG重復(fù)區(qū)，10一12個串聯(lián)排列的FLG重復(fù)區(qū)，以及C一端截短FLG重復(fù)區(qū)、C一末端結(jié)構(gòu)域依次組成，其中FLG重復(fù)區(qū)是最重要的功能域。Profilaggrin合成后被磷酸化成不可溶前體、存儲在透明角質(zhì)顆粒中。表皮終末分化的最后階段(角質(zhì)細(xì)胞從顆粒層遷移到角質(zhì)層的過程)，profilaggrin經(jīng)去磷酸化和多級水解形成約35KDa的filaggrin活性單體:單體特異性的聚合在表皮中表達(dá)角蛋白中間絲KRTI/KRTIO，，使其平行緊密排列成大纖維，構(gòu)成角質(zhì)層細(xì)胞被膜 (CornifiedCellEnvelope，CCE)的蛋白骨架、參與CCE的形成。filaggin形成的角質(zhì)包膜為一個不能溶解的屏障，在阻止表皮水分流失的同時，保護(hù)機體不受環(huán)境的影響;且表皮屏障的完整性對于阻止外界過敏原的侵入具有十分重要

8]。到目前為止，己經(jīng)發(fā)現(xiàn)了40多種FLG突變，其突變位點具有人群、種族特異性I’9](見圖1一2)。而國內(nèi)研究FLG基因突變與漢族人群支氣管哮喘的相關(guān)性報道不多，且我國地域遼闊，地區(qū)人群差異大，漢族人群支氣管哮喘患者FLG基因突變尚未有報道，故有必要進(jìn)行相關(guān)研究。3702d侖IG臼422X灌IOZgdelCAT翻W探飛狂岌，李蘇XQ24誰了XKorea引3321de!A曝51。。·出·i一bi·di、“m·i二日dom·‘·滕，m，‘t廠 LGrep·at·到二G陀peats.。沁確 inaldomaln圖1一 2:FLG已報導(dǎo)的突變分布圖【20]本研究采用病例一對照的研究方法，以中國湖南地區(qū)漢族人群散發(fā)支氣管哮喘患者和正常個體為研究對象，在FLG基因內(nèi)部選擇亞洲人群較多見的突變位點3321delA及K4022X進(jìn)行研究
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R562.25

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 鐘南山;未來十年哮喘防治展望[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;2001年06期

2 中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會呼吸學(xué)組;第八屆全國兒科呼吸系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議征文通知[J];中華兒科雜志;2001年12期

3 中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會哮喘學(xué)組;支氣管哮喘防治指南(支氣管哮喘的定義、診斷、治療及教育和管理方案)[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2003年03期

本文編號：2642092