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慢性阻塞性肺疾病大鼠膈肌纖維適應性變化的研究

發(fā)布時間:2020-04-25 06:25
【摘要】: 目的 以COPD模型大鼠的膈肌為標本,檢測COPD病程中膈肌的相應變化,包括膈肌肌纖維分布,肌纖維中酶活性的變化,探討COPD病程的不同階段膈肌功能狀態(tài)與疾病狀態(tài)的相關性,揭示膈肌功能的變化規(guī)律。 方法 選取健康雄性七周齡Wistar大鼠25只,體重180~220g,按體重隨機分成五組,1.對照組(n=5)。2.COPD組(n=20)。在自制的密閉有機玻璃艙內(nèi)用熏煙的方法制作大鼠COPD模型,在COPD組中包括四個組:A、COPD一天組(n=5),,模型制作成功后,第一天取材:B、COPD一月組(n=5),模型制作成功后一個月取材:C、COPD二月組(n=5),模型制作成功后兩個月取材:D、COPD三月組(n=5),模型制作成功后三個月取材。大鼠活殺,取膈肌做冰凍切片,利用肌球蛋白ATP酶(mATPase)法測定三磷酸腺苷脫氫酶(ATP酶)活性,三磷酸腺苷脫氫酶活性部位形成棕黑色硫化鈷顆粒沉淀;測定琥珀酸脫氫酶(SDH)活性,琥珀酸脫氫酶活性部位呈紫藍色沉淀,利用琥珀酸脫氫酶(線粒體氧化性的標志性酶)活性的差異,可以將肌纖維分為氧化型和酵解型兩種類型,肌纖維染色深的是氧化型纖維,染色淺的是酵解型纖維。觀察大鼠COPD不同病程膈肌纖維類型的適應性變化及酶活性變化,與健康對照組的大鼠膈肌進行比較,并且比較COPD不同病程組間的差異。統(tǒng)計分析采用SPSS13.0數(shù)據(jù)包分析,用單因素方差分析,若P<0.05,再進行q檢驗,比較每兩組的組間差異,并在A,B,C,D四組中進行相關分析,比較干預因素與測量因素之間有無相關性。 結果 1.COPD大鼠模型制作成功:肺組織HE染色切片,光鏡下觀察,其病理改變與人類慢性支氣管炎、肺氣腫相似。 2.與對照組比較,COPD組三磷酸腺苷脫氫酶活性有減少的趨勢。 3.與對照組比較,COPD組琥珀酸脫氫酶活性有增加的趨勢。 4.比較各組膈肌纖維類型的變化,統(tǒng)計分析結果顯示: (1) COPD四組的氧化型纖維比例均顯著高于對照組的(P<0.05);酵解型纖維比例均顯著低于對照組的(P<0.05)。 (2) COPD中A、B、C組間,均無顯著性差異(P>0.05),COPD中B、C、D組間,均無顯著性差異(P>0.05)。 (3) COPD中D組的氧化型纖維比例顯著高于A組(P<0.05);D組的酵解型纖維比例顯著低于A組(P<0.05)。 (4) COPD疾病的嚴重程度與氧化型纖維比例的相關分析結果:存在正相關(P<0.05)。 結論 1.三磷酸腺苷脫氫酶是分解利用能量ATP的酶,研究結果顯示COPD組的三磷酸腺苷脫氫酶活性傾向于低于對照組的,即ATP的利用率下降了。 2.琥珀酸脫氫酶(SDH)是線粒體氧化活動的標志性酶,研究結果顯示COPD組的琥珀酸脫氫酶活性相對于對照組的有增加的趨勢,表明線粒體的氧化能力增強。 3.然后經(jīng)過分析表明COPD膈肌肌纖維的SDH/mATPase高于對照組相應的肌纖維的SDH/mATPase;以上這些結果證明了大鼠COPD膈肌纖維線粒體的氧化能力即產(chǎn)生ATP的能力相對于ATP的利用率是增加的。 4.根據(jù)膈肌纖維類型變化的統(tǒng)計分析結果,COPD初期膈肌氧化型纖維比例顯著多于對照組,纖維類型傾向于由酵解型向氧化型轉化,即膈肌纖維向著耐疲勞類型轉化,說明膈肌的耐疲勞性增加。 5.COPD早期階段,隨著病程的進展,膈肌氧化型纖維比例不斷增多,表明酵解型纖維轉化為氧化型纖維,COPD嚴重程度與氧化型纖維比例的相關性分析說明這種轉化是與COPD的嚴重性成正相關的,即隨著COPD嚴重性的增加,轉化的程度增大。 6.COPD早期階段膈肌結構和酶學成分的變化,將成為COPD呼吸肌耐受疲勞的組織學基礎。
【圖文】:

分布圖,隔肌,纖維,氧化型


2、各組隔肌纖維類型分布(唬拍酸脫氫酶染色)見圖3,圖4,圖5,圖6,圖7及表1。圖3,正常隔肌的纖維分型100倍;圖上箭頭所示:SDH+纖維即氧化型纖維。圖4,A組隔肌纖維類型分布;圖5,B組隔肌纖維類型分布圖6

分布圖,隔肌,纖維類型


圖5,圖6,圖7及表1。圖3,正常隔肌的纖維分型100倍;圖上箭頭所示:SDH+纖維即氧化型纖維。圖4,A組隔肌纖維類型分布;圖5,B組隔肌纖維類型分布圖6,C組隔肌纖維類型分布圖7
【學位授予單位】:中國醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2007
【分類號】:R563.9

【引證文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李素云;李亞;李建生;鄧麗;田燕歌;姜素麗;王英;;補肺健脾方對慢性阻塞性肺疾病大鼠膈神經(jīng)放電和膈肌功能的影響[J];中國中西醫(yī)結合雜志;2012年06期



本文編號:2639913

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