發(fā)布時(shí)間：2017-03-18 07:02

  本文關(guān)鍵詞：Claudin在銅綠假單胞菌感染所致急性肺損傷中表達(dá)變化及其意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分Claudin在銅綠假單胞菌感染所致急性肺損傷中表達(dá)變化情況 目的本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立大鼠肺損傷模型,旨在研究claudin在銅綠假單胞菌(PA)感染所致急性肺損傷(ALI)中的表達(dá)變化情況及其可能的意義。 方法實(shí)驗(yàn)選用清潔級(jí)SD大鼠,隨機(jī)分為正常大鼠(N組)、陰性對(duì)照組(C組)和銅綠假單胞菌組(P組),C組和P組分別設(shè)氣道滴入生理鹽水(NS)或PA后3h、9h和24h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)。腹主動(dòng)脈抽血行動(dòng)脈血?dú)夥治�；腹腔放血處死�?收集肺組織標(biāo)本,行肺泡灌洗術(shù),檢測(cè)肺泡灌洗液(BALF)中總蛋白濃度；HE染色光鏡下觀察肺組織病理改變情況并行肺損傷評(píng)分,以評(píng)價(jià)造模后肺損傷程度。檢測(cè)肺組織mRNA及蛋白水平claudin-3、-4、-18和-5表達(dá),以觀察PA感染所致肺損傷中claudin表達(dá)變化情況。 結(jié)果P組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)動(dòng)脈血氧分壓均較N組和C組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)下降,P-24h下降與P-3h、P-9h比較有顯著差異：BALF中總蛋白濃度P組較N組和C組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)有明顯升高,P-3h、P-9h、P-24h總蛋白濃度顯著逐漸增高。光鏡下可見P組有明顯病理改變,P-3h有少許炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；P-9h肺泡腔增寬,肺泡間隔內(nèi)大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)：P-24h可見肺泡間隔增寬更為明顯,有大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),伴肺泡間隔內(nèi)毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血和部分肺不張；肺損傷評(píng)分P-24h顯著高于P-3h、P-9h。Claudin-4、-18和-5mRNA在P-24h時(shí)顯著增高而claudin-3mRNA則無(wú)明顯變化；claudin-3、-4、-18和-5蛋白水平均無(wú)明顯變化。 結(jié)論1.大鼠氣道內(nèi)注入PA出現(xiàn)病理生理學(xué)變化,時(shí)間越長(zhǎng)損傷越明顯,以P-24h損傷最為嚴(yán)重。2.Claudin-4、-18和-5mRNA在損傷最重的P-24h表達(dá)明顯高于其他時(shí)間點(diǎn)以及C組、N組,而claudin-3、-4、-18和-5蛋白水平則沒(méi)有明顯改變,肺組織中claudin-4、-18和-5mRNA增高可能是肺損傷早期增強(qiáng)上皮屏障功能的一種保護(hù)性機(jī)制。 第二部分Claudin在銅綠假單胞菌所致急性肺損傷中表達(dá)變化的意義 目的本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立大鼠肺損傷模型,觀察PA引起的claudin表達(dá)改變對(duì)緊密連接(TJs)結(jié)構(gòu)的影響,并在BALF中檢測(cè)claudin蛋白的變化,分析其與肺損傷程度的相關(guān)性,以了解claudin對(duì)肺損傷的意義。 方法電鏡下觀察肺泡上皮細(xì)胞、肺血管內(nèi)皮細(xì)胞以及上皮細(xì)胞之間的TJs結(jié)構(gòu)；檢測(cè)肺組織表面活性蛋白SP-A、SP-B和SP-C,假性血管性血友病因子(vWF)mRNA表達(dá)情況；行肺泡灌洗術(shù),檢測(cè)BALF中claudin-3、-4、-18和-5濃度并對(duì)BALF中claudin的含量與肺損傷評(píng)分做spearman相關(guān)分析,分析claudin表達(dá)變化在急性肺損傷中的意義。 結(jié)果電鏡觀察P組肺組織超微結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)病理變化,P-3h肺泡上皮細(xì)胞輕度破壞,細(xì)胞之間TJs較正常。P-9h肺泡上皮細(xì)胞特別是I型肺泡上皮細(xì)胞明顯破壞,腫脹、呈空泡狀,TJs不緊密。P-24h I型肺泡上皮翹起、呈空泡狀、部分上皮結(jié)構(gòu)消失,可見內(nèi)皮細(xì)胞破裂,嚴(yán)重處可見氣血屏障三層結(jié)構(gòu)均破壞,TJs結(jié)構(gòu)不易在鏡下找到。肺組織SP-A、SP-B、SP-C及vWF mRNA表達(dá)P組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)與C組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)及N組之間均無(wú)顯著變化。BALF中claudin-3、-4和-18在N組和C組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)含量均較低,而在P組明顯增高,且P-3h、P-9h、P-24hBALF中claudin含量顯著逐漸增高,spearman相關(guān)分析顯示BALF中claudin-3、-4和-18含量分別與肺損傷評(píng)分顯著正相關(guān)。Claudin-5在N組和C組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)含量低,在PA造模后3h迅速增高,9h、24h較3h略有增高,claudin-5與肺損傷評(píng)分無(wú)明顯相關(guān)性。 結(jié)論1BALF中Claudin-3、-4和-18含量在P-3h、P-9h和P-24h逐漸升高,并與肺損傷嚴(yán)重程度正相關(guān),可能成為PA感染所致ALI早期肺泡上皮細(xì)胞損傷潛在的分子標(biāo)記物。2.BALF中claduin-5含量在3h、9h和24h均升高但與肺損傷嚴(yán)重程度無(wú)明顯相關(guān),提示BALF中claduin-5含量增高不能作為早期肺損傷微血管內(nèi)皮細(xì)胞破壞的分子標(biāo)記物。
【關(guān)鍵詞】：Claudin 急性肺損傷 銅綠假單胞菌 Claudin 急性肺損傷 肺泡灌洗液 超微結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R563.8
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 引言9-14
• 參考文獻(xiàn)11-14
• 第一部分 Claudin在銅綠假單胞菌感染所致急性肺損傷中表達(dá)變化情況14-40
• 前言14-15
• 材料和方法15-25
• 結(jié)果25-33
• 討論33-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 第二部分 Claudin在銅綠假單胞菌感染所致急性肺損傷中表達(dá)變化的意義40-58
• 前言40-41
• 材料與方法41-47
• 結(jié)果47-54
• 討論54-56
• 參考文獻(xiàn)56-58
• 全文小結(jié)58-59
• 綜述59-68
• 參考文獻(xiàn)64-68
• 碩士期間成果68-69
• 致謝69-71

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 宋琳,瞿介明;銅綠假單胞菌肺部炎癥及其肺損傷的發(fā)病機(jī)制[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊(cè);2005年07期

2 王志芳;張旭剛;;呼吸道感染的銅綠假單胞菌質(zhì)粒介導(dǎo)的AmpCβ-內(nèi)酰胺酶耐藥性研究[J];臨床薈萃;2007年24期

3 李倬哲,瞿介明,何禮賢,陳雪華,王葆青;粒細(xì)胞減少大鼠銅綠假單胞菌肺部感染模型的建立及炎癥反應(yīng)研究[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2001年11期

4 程曉明,朱波,張彥琦,錢桂生;急性肺損傷和急性呼吸窘迫綜合征604例臨床分析[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2004年15期

  本文關(guān)鍵詞：Claudin在銅綠假單胞菌感染所致急性肺損傷中表達(dá)變化及其意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：254068