【摘要】：目的探討二氧化硅(Si O2)刺激的人肺泡上皮細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞水通道蛋白4(AQP-4)的表達(dá)及意義。方法將A549細(xì)胞分為0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 h染塵組和抑制劑組,各染塵組分別以質(zhì)量濃度為50 mg/L的Si O2混懸液刺激相應(yīng)時(shí)間,抑制劑組先以濃度為100μmol/L的AQP-4抑制劑TGN-020孵育2.0 h,再以質(zhì)量濃度為50mg/L的Si O2混懸液刺激1.0 h,另設(shè)不予任何處理的對(duì)照組;采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)AQP-4 mRNA表達(dá)。同時(shí),將A549細(xì)胞分為3.0、6.0、12.0、24.0 h染塵組和抑制劑組,各染塵組分別以質(zhì)量濃度為50 mg/L的Si O2混懸液刺激相應(yīng)時(shí)間,抑制劑組先以濃度為100μmol/L的TGN-020孵育2.0 h,再以質(zhì)量濃度為50 mg/L的Si O2混懸液刺激6.0 h,另設(shè)不予任何處理的對(duì)照組;分別采用免疫印跡法和免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)AQP-4蛋白表達(dá)。結(jié)果 RT-PCR分析結(jié)果顯示:與對(duì)照組比較,Si O2刺激后A549細(xì)胞AQP-4 mRNA相對(duì)表達(dá)水平呈現(xiàn)先升高后逐漸下降趨勢(shì),于刺激1.0 h后達(dá)到高峰值(P0.05),于刺激8.0 h后趨于正常水平(P0.05)。免疫印跡法和免疫細(xì)胞化學(xué)法分析結(jié)果均顯示:與對(duì)照組比較,Si O2刺激后A549細(xì)胞AQP-4蛋白呈現(xiàn)先升高后逐漸下降趨勢(shì),于刺激6.0 h后達(dá)到高峰值(P0.05),但于刺激24.0 h后仍未下降至正常水平(P0.01)。抑制劑組AQP-4的mRNA相對(duì)表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水平均低于Si O2刺激相同時(shí)間的染塵組(P0.01)。結(jié)論 Si O2刺激使A549細(xì)胞AQP-4的表達(dá)增高,其特異性抑制劑可抑制Si O2刺激引起的AQP-4表達(dá)增高,推測(cè)AQP-4可能參與了矽肺的發(fā)生發(fā)展過程。
[Abstract]:Objective to investigate the expression and significance of aquaporin 4 (AQP-4) in human alveolar epithelial cell line A549 stimulated by silica (Si O 2). Methods A549 cells were divided into two groups: the group of 0. 5, 1. 0 and 2. 0 and the control group. Each group was stimulated with 50 mg/L Si O 2 suspension for the corresponding time. The inhibitor group was incubated with AQP-4 inhibitor TGN-020 (100 渭 mol/L) for 2.0 h, and then stimulated with Si O 2 suspension of 50mg/L for 1.0 h. The AQP-4 mRNA expression was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR). At the same time, A549 cells were divided into 3. 0 0? 0? 0 and 24. 0 h exposure group and inhibitor group. Each group was stimulated with 50 mg/L Si O 2 suspension for the corresponding time. The inhibitor group was incubated with 100 渭 mol/L TGN-020 for 2.0 h, then stimulated with 50 mg/L Si O 2 suspension for 6.0 h. The control group was set up without any treatment, and the expression of AQP-4 protein was detected by Western blotting and immunocytochemistry, respectively. Results the results of RT-PCR analysis showed that the relative expression of AQP-4 mRNA in A549 cells increased at first and then decreased gradually compared with the control group, and reached a peak value at 1.0 h (P0.05) and a normal level at 8.0 h (P0.05). The results of immunoblotting and immunocytochemistry showed that compared with the control group, the AQP-4 protein of A549 cells increased firstly and then decreased gradually. The peak value was reached at 6.0 h after stimulation (P0.05), but it did not decrease to normal level at 24.0 h (P0.01). The relative mRNA expression and protein expression of AQP-4 in the inhibitor group were lower than those in the dust-exposed group at the same time after stimulation by Si O _ 2 (P0.01). Conclusion Si O 2 stimulation can increase the expression of AQP-4 in A549 cells, and its specific inhibitor can inhibit the increase of AQP-4 expression induced by Si O 2 stimulation. It is suggested that AQP-4 may be involved in the pathogenesis and development of silicosis.
【作者單位】： 河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科;河北聯(lián)合大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院;河北聯(lián)合大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究中心;
【基金】：河北省科技廳科技支撐項(xiàng)目(10276116D)
【分類號(hào)】：R135.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 謝艷萍;溫曉紅;姜志強(qiáng);輔桓欽;戴利成;韓慧;;水通道蛋白4在肺腺癌細(xì)胞中的表達(dá)及其對(duì)肺腺癌細(xì)胞增殖與遷移的影響[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年06期

2 邱新香;鄭倩玲;夏麗華;巫帶花;肖素娟;湯春宜;虢遠(yuǎn)寧;曾向嫩;陳英姿;盧秀鳳;;知信行模式對(duì)塵肺病患者健康教育干預(yù)應(yīng)用研究[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2014年03期

3 黃明;周永梅;宋向榮;黃昆潔;葛怡琛;賴關(guān)朝;梁偉輝;曾小菁;曾子芳;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)染矽塵大鼠肺損傷修復(fù)作用研究[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2014年04期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 彭潔;樊映川;張虹;;壓力對(duì)培養(yǎng)人眼小梁細(xì)胞水通道蛋白1mRNA表達(dá)及蛋白質(zhì)合成的影響[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年04期

2 黃明;周永梅;宋向榮;黃昆潔;葛怡琛;賴關(guān)朝;梁偉輝;曾小菁;曾子芳;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)染矽塵大鼠肺損傷修復(fù)作用研究[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2014年04期

3 毛麗君;史志澄;李樹強(qiáng);;水泥塵肺病例特點(diǎn)分析[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2014年06期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 桂治府;水通道蛋白4對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞遷移能力的影響[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳杰,白春學(xué),張敏,任振義,胡潔;水通道蛋白在人肺腺癌細(xì)胞株中的表達(dá)和意義[J];中國(guó)肺癌雜志;2004年03期

2 劉文彬;劉貴穎;;大鼠支氣管肺泡灌洗方法的研究進(jìn)展[J];臨床肺科雜志;2012年04期

3 劉軍,石琳琳,楊紅,麻彤輝;細(xì)胞運(yùn)動(dòng)中的水通道蛋白——細(xì)胞遷移及相關(guān)生理和病理機(jī)制的新視點(diǎn)[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2005年07期

4 鄧雪凝;徐娜;唐學(xué)玲;;三水區(qū)農(nóng)民工職業(yè)衛(wèi)生認(rèn)知現(xiàn)狀調(diào)查[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2009年01期

5 陳田林;羅嵐;陳紹輝;;塵肺病患者心理干預(yù)體系探討[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2011年03期

6 江志榮;林祥吉;饒春燕;朱岸平;;深圳市外來務(wù)工人員職業(yè)衛(wèi)生防護(hù)知識(shí)、態(tài)度及行為調(diào)查[J];中國(guó)健康教育;2009年05期

7 項(xiàng)陽,馬兵,李濤,于和鳴,李學(xué)軍;乙酰唑胺抑制腫瘤轉(zhuǎn)移及荷瘤小鼠肺相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2002年08期

8 邱新香;郝元濤;梁智平;肖素娟;吳秀芳;陳慈珊;林愛華;;塵肺患者生活質(zhì)量的相關(guān)因素研究[J];中國(guó)衛(wèi)生統(tǒng)計(jì);2011年03期

9 關(guān)兵,董震;水通道蛋白與腫瘤[J];中國(guó)腫瘤臨床;2005年13期

10 趙景民,翟為溶,張?jiān)露?朱虹光,莊麗,湯釗猷;肝細(xì)胞癌整合蛋白α5β1、纖維連接蛋白及其降解片段的表達(dá)[J];中華病理學(xué)雜志;1997年02期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 呂俊鋒;張玉成;杜珍武;張桂珍;;核心蛋白聚糖真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在A549中的表達(dá)[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2011年05期

2 徐洪濤;楊慧;常立文;李文斌;趙玲霞;袁文浩;劉偉;蔡保歡;王席娟;;高體積分?jǐn)?shù)氧致A549細(xì)胞肺表面活性物質(zhì)蛋白-A表達(dá)的變化[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2012年14期

3 王蘭;田菲;陳亮;張俊平;何流;王亞盼;;扶正解毒方含藥血清對(duì)人肺癌細(xì)胞(A549)增殖和凋亡的影響[J];四川中醫(yī);2012年12期

4 顧紅兵;;Micro RNA-646在脂多糖處理后的A549細(xì)胞中的表達(dá)及功能分析[J];大家健康(學(xué)術(shù)版);2013年22期

5 張繼賢;趙鶯;張曉仙;張啟昆;萬毅新;;阿霉素化療與熱化療對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株A549細(xì)胞抑制作用的比較研究[J];浙江臨床醫(yī)學(xué);2006年07期

6 盧強(qiáng);黃立軍;韓勇;閆小龍;張新偉;李小飛;;高壓電場(chǎng)對(duì)A549肺癌細(xì)胞株轉(zhuǎn)移潛能影響研究[J];中華腫瘤防治雜志;2014年01期

7 王俊宏,潘世揚(yáng),黃s顂，

本文編號(hào)：2240013