本文關(guān)鍵詞：PPARα基因多態(tài)性及mRNA表達(dá)與COPD骨骼肌線粒體功能、超微結(jié)構(gòu)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《昆明醫(yī)學(xué)院》 2010年

PPARα基因多態(tài)性及mRNA表達(dá)與COPD骨骼肌線粒體功能、超微結(jié)構(gòu)研究

龍翔宇  

【摘要】： 目的:探索COPD病人股外側(cè)肌肉PPARα基因rs45550937(C/G),rs45552534(A/G),rs45576140(C/G),rs45528736(A/G),rs45576734(A/G)五個(gè)位點(diǎn)的多肽性及mRNA表達(dá)水平與肌肉中線粒體呼吸功能、超微結(jié)構(gòu)關(guān)系。 方法:對(duì)昆明地區(qū)123例COPD患者和61例年齡匹配正常對(duì)照者的身體組成及肺功能進(jìn)行測(cè)量,并對(duì)PPARα的五個(gè)突變位點(diǎn)rs45550937(C/G),rs45552534(A/G),rs45576140(C/G),rs45528736(A/G),rs45576734(A/G)采用多聚酶鏈和測(cè)序的方法進(jìn)行多態(tài)性分析。并隨機(jī)對(duì)其中的6例健康對(duì)照組(Control),8例COPD正常體重(BMIN)及6例低體重COPD(BMIL)病人,行股外側(cè)肌活檢,對(duì)活檢的肌肉用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)PPARα基因的mRNA,冷凍離心法提取肌肉中線粒體,Clark氧電極法測(cè)定線粒體呼吸功能,根據(jù)線粒體呼吸耗氧量換算出ST3、ST4、RCR(ST3/ST4),并在透射電鏡下觀察單位骨骼肌橫切面積上線粒體數(shù)目,線粒體面積,Z線寬度。 結(jié)果:在正常對(duì)照和COPD患者中,PPARα的上述五個(gè)位點(diǎn)未發(fā)現(xiàn)有突變; PPARα基因的mRNA表達(dá)在三組中分別為(單位:AU):0.82±0.10,0.64±0.09,0.41±0.12,在COPD病人中表達(dá)下降,在低體重COPD病人中下降明顯(p＜0.01); 線粒體呼吸控制率RCR(ST3/ST4)在COPD病人中降低(5.13±0.35vs3.50±0.71),各組間均可見(jiàn)差異(p＜0.01); 電鏡下COPD病人單位肌肉截面積線粒體數(shù)目在Control、BMIN、BMIL三組中分別為0.52±0.06、0.43±0.08、0.32±0.07,線粒體橫截面積百分比在三組中分別為4.31±0.76、3.71±0.47、2.50±0.37。與Control相比,BMIN組的線粒體數(shù)目面積(線粒體體積密度)下降不明顯(p均＞0.05),BMIL組中明顯下降(p均＜0.01)。Z線(代表肌纖維類型)在BMIL組明顯下降(103.2±6.42vs87.2±8.79,p=0.024)。 PPARα基因的mRNA表達(dá)水平與RCR,單位肌肉橫切面積內(nèi)線粒體數(shù)目n、面積百分比正相關(guān),其r值分別為0.71,r=0.69,r=0.75,p均＜0.01。PEARα的mRNA表達(dá)與Z線寬度(代表肌纖維類型)正相關(guān)(r=0.63,p＜0.01) 結(jié)論:在COPD病人中,上述PPARα基因位點(diǎn)昆明在地區(qū)突變率低,與其mRNA表達(dá)下調(diào)無(wú)關(guān)。需要進(jìn)一步篩查PPARα的其他基因位點(diǎn)。 COPD患者的骨骼肌質(zhì)量還未下降(FFMI評(píng)估),線粒體的電子傳遞鏈和氧化磷酸化(RCR評(píng)估)即出現(xiàn)了異常,但線粒體的體積密度得到了維持,而在低體重的COPD患者中,二者均下降。線粒體的電子傳遞鏈和氧化磷酸化先于線粒體的體積密度改變,是COPD患者骨骼肌功能障礙的早期事件。 PPARα基因的mRNA表達(dá)下調(diào),并與線粒體呼吸功能,單位肌肉橫切面積內(nèi)線粒體面積比分下降相關(guān),或許,PPARα基因的mRNA的表達(dá)下降是線粒體呼吸功能下降,體積密度減少的一個(gè)原因。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R563.9
【目錄】：

縮略語(yǔ)表5-7

中文摘要7-9

英文摘要9-11

前言11-16

參考文獻(xiàn)13-16

研究對(duì)象、材料與方法16-26

結(jié)果26-37

討論37-41

參考文獻(xiàn)41-45

結(jié)論45-46

附錄46-54

參考文獻(xiàn)52-54

綜述54-61

參考文獻(xiàn)59-61

讀書(shū)期間發(fā)表文章61-62

致謝62

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