本文選題：Flotillin- + 肺上皮細胞��； 參考：《廣東醫(yī)學》2017年05期

【摘要】：目的 了解Flotillin-2(Flot-2)在高氧誘導肺上皮細胞凋亡中的調(diào)控分子機制。方法 把小鼠置于高氧環(huán)境中處理24 h后,取其肺臟切片通過免疫組化檢測Flot-2的表達。通過體外肺上皮細胞株進一步驗證高氧后Flot-2在細胞中基因和蛋白水平的表達情況。通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的方式把Flot-2的基因整合進肺上皮細胞的基因組中使Flot-2高表達,把肺上皮細胞分別置于空氣和高氧環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng)24 h,收集細胞后提取總蛋白,通過Westen blot檢測經(jīng)典凋亡途徑中的各個相關因子,包括Caspase-3、Caspase-9,以及線粒體和細胞質(zhì)中的細胞色素C,進一步研究在Flot-2高表達情況下,高氧對細胞凋亡的影響。結果 Flot-2廣泛存在于支氣管上皮和肺泡上皮細胞中,高氧刺激后表達明顯增加。肺上皮細胞經(jīng)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染高表達Flot-2之后接受高氧刺激,細胞的死亡減少,凋亡途徑中關鍵的凋亡蛋白Caspase-3及其活性片段cleaved-Caspase-3明顯減少。內(nèi)源性線粒體途徑中關鍵的凋亡蛋白Caspase-9及其活性片段cleaved-Caspase-9也明顯減少。同時線粒體中的細胞色素C的釋放也相應減少。結論 高氧刺激可使肺上皮細胞Flot表達上調(diào),其作用是保護細胞對抗高氧所造成的損傷,調(diào)控的分子機制與細胞的線粒體凋亡途徑有關。
[Abstract]:Objective to investigate the regulatory molecular mechanism of Flotillin-2 Flot-2 in hyperoxia-induced apoptosis of pulmonary epithelial cells. Methods after the mice were exposed to hyperoxia for 24 h, the expression of Flot-2 was detected by immunohistochemistry. The expression of Flot-2 gene and protein in lung epithelial cell line after hyperoxia was further verified in vitro. The Flot-2 gene was integrated into the genome of pulmonary epithelial cells by plasmid transfection to make Flot-2 overexpression. Pulmonary epithelial cells were cultured in air and hyperoxia for 24 hours, and the total protein was extracted after collecting the cells. The effects of hyperoxia on apoptosis were investigated by Westen blot, including Caspase-3, Caspase-9, cytochrome C in mitochondria and cytoplasm. Results Flot-2 existed widely in bronchial epithelium and alveolar epithelial cells, and the expression of Flot-2 was significantly increased after hyperoxia stimulation. Pulmonary epithelial cells were stimulated by hyperoxia after transfection with high expression of Flot-2, and the cell death decreased, and the key apoptotic protein Caspase-3 and its active fragment, cleaved-Caspase-3, decreased significantly. The key apoptotic protein Caspase-9 and its active fragment cleaved-Caspase-9 in endogenous mitochondrial pathway were also significantly reduced. At the same time, the release of cytochrome C in mitochondria was also reduced. Conclusion hyperoxia stimulation can up-regulate the expression of Flot in lung epithelial cells, which protects the cells from the damage caused by hyperoxia. The molecular mechanism of hyperoxia regulation is related to the apoptosis pathway of mitochondria.
【作者單位】： 廣州市第一人民醫(yī)院南沙醫(yī)院病理科;廣州市第一人民醫(yī)院圖書館;廣州市第一人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科;

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