大鼠實驗性矽肺中樹突狀細胞及其相關細胞因子分布規(guī)律
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《鄭州大學》 2015年
大鼠實驗性矽肺中樹突狀細胞及其相關細胞因子分布規(guī)律
暴磊
【摘要】:背景和目的矽肺危害嚴重,然而機制仍不完全清楚,但已知其發(fā)生發(fā)展過程的關鍵環(huán)節(jié)之一是免疫反應。樹突狀細胞(dendritic cell,DC)是已知功能最強的抗原呈遞細胞,且與巨噬細胞有相近、交叉的結構與功能,推測DC在矽塵識別與攝取、矽肺獲得性免疫應答中很可能也是極其重要的效應細胞。因此建立大鼠實驗性矽肺模型,對不同時間點大鼠肺組織和外周血中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80及其相關細胞因子進行檢測。初步探討其在矽肺發(fā)生發(fā)展過程中的作用及意義,為進一步開展矽肺免疫干預研究提供新思路和理論依據(jù)。方法1、選用河南省實驗動物中心提供的無特定病原體(Specific pathogen free,SPF)健康成年雄性SD大鼠96只,體重200~250g。將其隨機分為2組:染塵組、對照組。2、采用非氣管暴露法染塵建立大鼠矽肺模型,分別在染塵前、染塵后24h、1周、2周3周、6周、9周、12周處死6只。3、流式細胞術對外周血中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80進行檢測。4、免疫組化法對肺組織中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80進行定位、分布。5、酶聯(lián)免疫吸附測定法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測肺組織中細胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-18、IL-4和IL-10的表達。6、統(tǒng)計方法:采用Excel2007建立數(shù)據(jù)集,應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析,數(shù)據(jù)的統(tǒng)計描述以(X±S)表示,兩組間均數(shù)比較采用t檢驗;Pearson相關進行相關性分析。檢驗水準α=0.05。結果1、染塵組外周血CD80和MHC-Ⅱ的表達量在染塵后逐漸升高,在2周表達量最高并保持穩(wěn)定。染塵組與對照組外周血CD80、MHC-Ⅱ的表達量在染塵2周后差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);染塵組肺組織CD80表達量在染塵后逐漸增加,在2周表達量最高并保持穩(wěn)定,染塵組與對照組肺組織CD80的表達量在染塵2周后差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。染塵組肺組織MHC-Ⅱ表達量在染塵后1周到達高峰并保持穩(wěn)定,染塵組與對照組肺組織MHC-Ⅱ在染塵1周后差異有統(tǒng)計學意義。2、染塵后各時間點染塵組TNF-α表達量均高于對照組(P0.05);染塵后24h、1周和2周染塵組IFN-γ表達量高于對照組(P0.05);染塵后1周染塵組中IL-4表達量低于對照組(P0.05),染塵后9周及12周高于與對照組(P0.05);染塵后6周、9周染塵組IL-10表達量高于對照組(P0.05)。3、Pearson相關性分析顯示,染塵組大鼠外周血中CD80、MHC-Ⅱ與IL-18、IL-4、IL-10均相關,相關系數(shù)分別為0.367、0.429,0.516、0.615,-0.419、-0.432(P0.05)。結論在大鼠實驗性矽肺模型中,樹突狀細胞增殖并且調(diào)控Th1/Th2型細胞因子的分泌,參與矽肺的發(fā)生發(fā)展過程。
【關鍵詞】:
【學位授予單位】:鄭州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R135.2
【目錄】:
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