本文關(guān)鍵詞： MTT法 哮喘 脾淋巴細(xì)胞 卵蛋白　出處：《毒理學(xué)雜志》2014年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討MTT法檢測(cè)卵蛋白(OVA)刺激哮喘小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的最佳實(shí)驗(yàn)條件。方法制備OVA誘導(dǎo)哮喘小鼠模型,分離脾淋巴細(xì)胞。接種不同濃度的脾淋巴細(xì)胞,在不同培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)測(cè)定吸光度(A)值,確定最佳細(xì)胞濃度和檢測(cè)時(shí)間。觀察不同濃度OVA對(duì)脾淋巴細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果最佳脾淋巴細(xì)胞接種濃度為2×106~4×106cells/ml,最佳檢測(cè)時(shí)間為48 h。培養(yǎng)24和48 h時(shí),細(xì)胞濃度為1×106~4×106cells/ml,A值與細(xì)胞濃度呈線性關(guān)系(r0.99)。10μg/ml OVA可誘導(dǎo)脾淋巴細(xì)胞顯著增殖,100μg/ml OVA反而抑制脾淋巴細(xì)胞增殖。結(jié)論 MTT法可用于檢測(cè)哮喘小鼠的脾淋巴細(xì)胞增殖,細(xì)胞濃度與A值呈線性關(guān)系。OVA濃度是影響脾淋巴細(xì)胞增殖的重要因素。
[Abstract]:Objective to investigate the optimal experimental conditions for the detection of ovalbumin (OVA) in asthmatic mice by MTT. Methods the model of asthmatic mice induced by OVA was established and splenic lymphocytes were isolated and inoculated with different concentrations of splenic lymphocytes. The absorbance A value was measured at different culture time points. The optimal cell concentration and detection time were determined. The effects of different concentrations of OVA on the proliferation of splenic lymphocytes were observed. Results the optimal concentration of splenic lymphocyte inoculation was 2 脳 10 6 + 4 脳 10 6 cells / ml, the best detection time was 48 h. There was a linear relationship between the cell concentration of 1 脳 106 cells / ml and the cell concentration. R 0.99 渭 g / ml OVA could induce the proliferation of splenic lymphocytes significantly, 100 渭 g / ml OVA could inhibit the proliferation of splenic lymphocytes. Conclusion the method of MTT can be used to detect the proliferation of splenic lymphocytes in asthmatic mice. There was a linear relationship between cell concentration and A value. The concentration of OVA was an important factor affecting the proliferation of splenic lymphocytes.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍呼吸疾病研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30900657) 第三軍醫(yī)大學(xué)科研創(chuàng)新基金(2008D203)
【分類號(hào)】：R562.25

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1513713