PLTP在香煙誘導(dǎo)A549細(xì)胞合成白介素8中的作用
發(fā)布時間:2017-12-04 23:00
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【摘要】:目的:研究磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(Phospholipid transfer protein,PLTP)對香煙誘導(dǎo)人肺泡上皮A549細(xì)胞合成白介素8(Interleukin-8,IL-8)的影響。方法:體外培養(yǎng)人肺泡上皮A549細(xì)胞株24 h,加入不同濃度的煙草提取物(Cigarette smoking extracts,CSE)共培養(yǎng)24 h;1.0%CSE與A549細(xì)胞株共培養(yǎng)6、12、24、48 h;PLTP siRNA預(yù)處理后,加入CSE共培養(yǎng)24 h。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT)法檢測A549細(xì)胞增殖情況;實(shí)時定量PCR(RT-PCR)檢測PLTP和IL-8 mRNA的表達(dá)量;蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測PLTP的表達(dá)量;酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)檢測IL-8相對含量。結(jié)果:0.125%煙草提取物促進(jìn)A549細(xì)胞增殖,0.25%、0.5%、1.0%CSE濃度對A549細(xì)胞生長無明顯影響,而2.0%、4.0%CSE濃度抑制A549細(xì)胞增殖;不同濃度的(0.25%、0.5%、1.0%)CSE作用24 h后,PLTP和IL-8 mRNA及蛋白表達(dá)量增加,并且IL-8蛋白分泌呈現(xiàn)一定時間依賴性;PLTP siRNA處理后,IL-8表達(dá)量明顯升高(P0.001)。結(jié)論:PLTP基因缺失促進(jìn)香煙誘導(dǎo)A549細(xì)胞合成IL-8。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金青年基金(81200009) 重慶市衛(wèi)生局中醫(yī)藥研究課題(ZY20132165) 國家臨床重點(diǎn)?茖m(xiàng)資助(衛(wèi)辦醫(yī)政函[2012]649號)
【分類號】:R563
【正文快照】: 吸煙可以導(dǎo)致肺氣道損傷,引起肺部嚴(yán)重疾患。香煙中的固有成分及在燃燒所產(chǎn)生的有毒物質(zhì)可以引起肺部的炎癥反應(yīng)。調(diào)查研究顯示香煙煙霧暴露是導(dǎo)致肺損傷的一項(xiàng)重要危險因素[1]。研究表明, IL-8是煙霧吸入造成的肺損傷反應(yīng)中的重要介質(zhì)[2]。Aggarwal等[3]證實(shí),中性粒細(xì)胞激活,
本文編號:1252634
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