發(fā)布時(shí)間：2017-11-25 11:05

  本文關(guān)鍵詞：m-Calpain在慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌中表達(dá)的研究

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【摘要】：實(shí)驗(yàn)?zāi)康?激活鈣蛋白酶（m-calpain）可降解細(xì)胞的骨架蛋白并參與細(xì)胞凋亡過(guò)程。本研究探討m-Calpain蛋白及基因在慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠骨骼肌萎縮中的表達(dá)及意義。 實(shí)驗(yàn)方法 10-12周齡清潔級(jí)雄性Wistar大鼠40只（鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心），體重（220+32）g，按隨機(jī)數(shù)字表法分為模型組和對(duì)照組，每組各20只，模型組采用煙霧暴露和氣管內(nèi)注入內(nèi)毒素(LPS)法建立COPD大鼠模型。對(duì)照組用生理鹽水進(jìn)行偽暴露。第28天每組選5只大鼠進(jìn)行肺功能測(cè)定，，第29天處死后取肺組織及骨骼肌標(biāo)本觀察病理改變，采用TUNEL法測(cè)定骨骼肌細(xì)胞凋亡率，免疫組化法檢測(cè)m-Calpain和Caspase-3蛋白表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)m-Calpain和Caspase-3的mRNA的表達(dá)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1、模型組大鼠的FEV0.3、FEV0.3/FVC和呼氣流量峰值均顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。對(duì)照組大鼠肺組織病理正常；模型組大鼠肺組織病理明顯異常。 2、模型組大鼠膈肌和趾長(zhǎng)伸肌質(zhì)量均顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。模型組大鼠膈肌、趾長(zhǎng)伸肌肌與對(duì)照組病理均有明顯異常。模型組大鼠膈肌和趾長(zhǎng)伸肌細(xì)胞凋亡率均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。模型組大鼠膈肌和趾長(zhǎng)伸肌較對(duì)照組棕黃色或棕褐色凋亡細(xì)胞核均明顯增多。 3、模型組大鼠膈肌和趾長(zhǎng)伸肌m-calpain和caspase-3蛋白表達(dá)的吸光度值均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)顯示：模型組大鼠膈肌和趾長(zhǎng)伸肌中m-calpain蛋白和caspase-3蛋白表達(dá)較對(duì)照組顯著增強(qiáng)。逆轉(zhuǎn)錄-PCR技術(shù)檢測(cè)結(jié)果表明，模型組大鼠膈肌和趾長(zhǎng)伸肌中m-calpain、caspase-3的mRNA表達(dá)高于對(duì)照組，吸光度值均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論 COPD大鼠骨骼肌中m-Calpain和Caspase-3蛋白及mRNA表達(dá)水平增高，兩者呈顯著相關(guān)性，且與骨骼肌凋亡率顯著正相關(guān)，結(jié)果提示大鼠COPD模型中，m-Calpain可能通過(guò)caspase-3誘導(dǎo)骨骼肌細(xì)胞凋亡，參與了骨骼肌萎縮過(guò)程。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R563.9

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 宋一平,崔德健,茅培英,王德文;慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的建立及藥物干預(yù)的影響[J];中華內(nèi)科雜志;2000年08期

2 楊永健,朱文玲,周興文,張?chǎng)?祝之明;鈣蛋白酶參與心力衰竭患者心肌重構(gòu)的信號(hào)傳導(dǎo)[J];中華心血管病雜志;2005年03期

本文編號(hào)：1225778