本文關(guān)鍵詞：二氧化硅刺激A549細(xì)胞水通道蛋白-1表達(dá):體外研究

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【摘要】：[目的]研究二氧化硅(Si O2)粉塵刺激對人肺泡上皮A549細(xì)胞水通道蛋白-1(AQP-1)的表達(dá)及意義。[方法]將A549細(xì)胞分為對照組、染毒組及抑制劑組。其中染毒組細(xì)胞利用50 mg/L的Si O2混懸液刺激細(xì)胞,Si O2分別刺激0.5、1、2、4、8 h后檢測m RNA表達(dá);Si O2分別刺激3、6、12、24 h后檢測蛋白表達(dá)。抑制劑組則先加入AQP-1特異性的通道抑制劑氯化汞(Hg Cl2)孵育3 min后再加Si O2刺激2 h檢測m RNA,刺激6 h檢測蛋白表達(dá)。各組采用實時聚合酶鏈反應(yīng)法檢測AQP-1 m RNA表達(dá)水平,Western blot、免疫細(xì)胞化學(xué)檢測AQP-1蛋白表達(dá)水平。[結(jié)果]AQP-1m RNA表達(dá):與對照組相比,Si O2刺激后的0.5、1、2、4 h A549細(xì)胞AQP-1 m RNA的表達(dá)量分別是對照組的2.78、3.52、3.85、1.98倍,8 h時回到對照組水平(P0.01);抑制劑組的表達(dá)水平為相同刺激時間Si O2染毒組的65%。AQP-1蛋白表達(dá):1免疫印跡檢測結(jié)果顯示,與對照組相比,Si O2刺激后的3、6、12、24 h A549細(xì)胞的表達(dá)量分別為對照組的1.44、2.56、1.93、1.35倍(P0.05或P0.01);抑制劑組的表達(dá)水平低于相同刺激時間Si O2染毒組,為其70%(P0.01)。2免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示,與對照組相比,Si O2刺激后的3、6、12、24 h A549細(xì)胞的表達(dá)量分別為對照組的1.17、1.49、1.29、1.07倍(P0.05或P0.01)。抑制劑組的表達(dá)水平低于相同刺激時間Si O2染毒組,為其71%(P0.01)。[結(jié)論]Si O2刺激使A549細(xì)胞的AQP-1表達(dá)增高,其特異性抑制劑氯化汞可抑制Si O2刺激引起的AQP-1的表達(dá)增高,推測AQP-1可能參與了矽肺的發(fā)生發(fā)展過程。
【作者單位】： 華北理工大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗研究中心;華北理工大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院;華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：河北省科技廳科技支撐項目(編號:10276116D)
【分類號】：R135.2
【正文快照】： 眾所周知,二氧化硅(Si O2)粉塵是引起矽肺的關(guān)鍵致病因子和始動因素[1],其進(jìn)入肺組織后肺泡上皮細(xì)胞是Si O2損傷作用的關(guān)鍵靶細(xì)胞之一,尤其在損傷的初始階段。但Si O2誘導(dǎo)上皮細(xì)胞損傷的分子機制尚不清楚[2]。水通道蛋白(aquaporins,AQPs)是一組與水通透性有關(guān)的細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運蛋

【參考文獻(xiàn)】

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1 檀俊濤;王U，

本文編號：1190763