本文關鍵詞：p110δ在胎盤形成中的表達和功能作用的初步研究

  更多相關文章： p110δ 滋養(yǎng)層巨細胞 胎盤 流產

【摘要】：背景和目的:生命繁衍是人類社會持續(xù)發(fā)展的基礎。但是隨著人類文明的不斷發(fā)展,由于工作壓力、環(huán)境污染等來自各方各面的外部因素導致世界范圍內不孕不育人口顯著增加,人類的繁衍能力已亮起了警報燈。生殖健康問題日漸引起人們的高度緊張與重視。不孕不育的發(fā)生病例中有近一半為病因不明的重復性流產,生殖免疫學觀點認為這與免疫因素有關。磷脂酰肌醇3-激酶/絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶信號通路是具有酶活性的細胞內信號轉導通路,可從增殖、凋亡、分化、炎性反應、免疫等多方面影響機體功能。磷脂酰肌醇3-激酶共有四個p110催化亞基:α,β,δ,γ,其中p110α或p110β的缺失將導致胚胎致死,原因與胚胎血管生成相關。p110δ主要高表達于白細胞表面,這對研究其在生殖免疫過程中的作用十分有利。本課題預探索p110δ與在生殖中發(fā)揮的作用。方法和結果:首先利用p110δ突變失活小鼠模型(p110δD910A/D910A)進行配種繁殖,觀察小鼠生殖發(fā)育情況,發(fā)現(xiàn)小鼠存在產崽數(shù)減少情況,且這種生育異�，F(xiàn)象主要與雌性小鼠的p110δ基因型相關。進一步地取材觀察后發(fā)現(xiàn),p110δ突變失活引發(fā)的產崽數(shù)減少主要是因為胚胎妊娠中期,即胎盤生成后的胚胎流產所造成。隨后,通過對生殖系統(tǒng)相關器官的組織學觀察及病理技術染色發(fā)現(xiàn),p110δ突變失活對蛻膜組織、胎膜及胎盤的血管系統(tǒng)構成具有一定影響,主要表現(xiàn)為組織中血管稀疏、不連續(xù),血管網絡形成受限;此外,p110δ特異性地高表達于蛻膜時期的壁滋養(yǎng)層巨細胞(包括初級和次級的),缺失p110δ及其下游通路的激活,干擾了正常的滋養(yǎng)層細胞的功能活化,包括增殖、分化及與侵潤能力相關的MMPs的分泌情況。最后,通過PCR技術就上述實驗結果,對血管生成和滋養(yǎng)層細胞功能相關的基因的核酸轉錄水平進行了進一步的驗證。結論:p110δ突變失活導致妊娠期的血管生成系統(tǒng)及滋養(yǎng)層細胞功能異常,進而促使胎兒于妊娠中期,即胎盤生成時期,流產死亡。
【關鍵詞】：p110δ 滋養(yǎng)層巨細胞 胎盤 流產
【學位授予單位】：廣東藥學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R711.6
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 序言10-17
• 課題的研究思路17-18
• 材料與方法18-32
• 1. 材料18-22
• 1.1 常規(guī)試劑配制：18-20
• 1.2 其他試劑信息列表20-21
• 1.3 抗體信息列表21-22
• 1.4 主要儀器信息列表22
• 2. 方法22-32
• 2.1 實驗動物飼養(yǎng)與管理22-26
• 2.2 動物標本取材26-28
• 2.3 動情周期的檢測方法28
• 2.4 組織包埋與切片28-29
• 2.5 HE染色步驟29
• 2.6 天狼星紅染色法29
• 2.7 免疫組化（IHC）步驟29-30
• 2.8 免疫熒光步驟（石蠟切片）30
• 2.9 總RNA抽提與PCR30-32
• 2.10 EPC體外培養(yǎng)步驟32
• 實驗結果32-49
• 1. PI3K-p110δ突變失活對C57BL/6J小鼠的體癥體態(tài)的觀察32-33
• 2. PI3K-p110δ突變失活對C57BL/6J小鼠的生殖發(fā)育能力的影響24 3. PI3K-p110δ 在卵巢、子宮、胎盤中的表達情況33-35
• 4. PI3K-p110δ突變失活對雌性C57BL/6J小鼠的生殖系統(tǒng)的影響26 5. PI3K-p110δ突變失活對胚胎生長發(fā)育過程中產生的影響35-38
• 5. PI3K-p110δ突變失活對胚胎生長發(fā)育過程中產生的影響38-44
• 6. PI3K-p110δ特異性地表達于蛻膜時期的滋養(yǎng)層巨細胞44-46
• 7. PI3K-p110δ突變失活影響胚胎發(fā)育的細胞增殖和分化46-48
• 8. PI3K-p110δ突變失活影響胚胎發(fā)育過程中MMPs的表達48-49
• 小結49-51
• 討論51-58
• 參考文獻58-65
• 攻讀學位期間發(fā)表的論文及其他科研成果65-66
• 附件66-74
• 附錄 英文縮略詞匯74-75
• 致謝75

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據庫 前2條

1 徐宏;鄒琳;張保平;彭婧;張莉;況海斌;;小鼠外胎盤錐次級滋養(yǎng)層巨細胞的分離、培養(yǎng)與鑒定[J];激光生物學報;2010年02期

2 李靖;李炫誠;吳云霞;;確定小鼠動情周期的三種方法[J];實驗動物科學;2007年03期

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本文編號：883896