本文關鍵詞：PDIA3在胎膜早破患者胎盤及胎膜組織中的表達及意義

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【摘要】：胎膜早破(premature rupture of membrane,PROM)指孕婦胎膜于臨產前發(fā)生自發(fā)性破裂,目前可以據破膜發(fā)生時的孕周將胎膜早破分為足月胎膜早破(term premature rupture of membrane,TPROM)和未足月胎膜早破(preterm premature rupture of membrane,PPROM)。PROM約占妊娠的10%,80%~90%的PROM在24h內自然臨產,90%的PPROM在7天內臨產[1]。PROM可致早產率升高,宮內感染率升高,圍生兒病死率增加,產褥感染率升高[2],是圍生期最常見的并發(fā)癥[3]。PROM的病因有許多,但是其基本的病理變化是炎癥、應激反應以及細胞凋亡等,胎盤胎膜處的這些反應不僅可以弱化胎膜結構,也可激活孕婦的免疫系統(tǒng),引起胎膜破裂。本課題組前期已完成對PPROM和正常足月妊娠患者胎盤組織總蛋白質的分離,并用MALDI-TOF/TOF-MS鑒定出16個差異表達的蛋白質[4],我們選擇其中的蛋白質二硫鍵異構酶(protein disulfide isomerase,PDI)作為研究對象,PDI是一種主要位于哺乳動物內質網中的巰基-二硫鍵氧化還原酶,屬折疊酶[5]。這種蛋白在蛋白質轉運、鈣穩(wěn)態(tài)、蛋白質降解途徑、抗原呈遞、病毒入侵、精子卵子融合、免疫和損傷應激、信號調控、癌變等方面起重要作用[6]。PDIA3又稱ERp57,是該家族中巰基蛋白氧化還原酶的重要組分,屬內質網應激信號通道蛋白,能催化形成二硫鍵,具有分子伴侶活性。本實驗通過檢測PDIA3在胎膜早破患者胎盤以及胎膜組織中的表達,探討其在胎膜早破發(fā)病機制中發(fā)揮的作用,可能為預防及檢測PROM的發(fā)病提供新的方向。目的本課題通過研究pdia3mrna及其蛋白在pprom組,tprom組,正常足月妊娠組和早產組胎盤胎膜組織中的表達與定位,探討pdia3在胎膜早破發(fā)生、發(fā)展過程中的作用機制。材料和方法1.研究對象收取2013年9月至2014年9月,至河南省婦幼保健院經剖宮產分娩的tprom患者、pprom患者各30例作為實驗組。同時隨機抽取同時期入院經剖宮產分娩的正常足月產、因計劃外妊娠行中孕引產者各30例作為對照組。2.方法(1)運用免疫組織化學sp法對以上各組胎盤和胎膜組織中的pdia3蛋白的表達進行定位和半定量檢測。(2)運用實時熒光定量pcr(rt-pcr)法對以上各組胎盤和胎膜組織中的pdia3mrna的表達進行檢測。3.統(tǒng)計學處理所有數據均采用spss20.0軟件進行統(tǒng)計學分析。記量資料用sx±表示,兩組組間符合正態(tài)分布的計量數據采用兩獨立樣本t檢驗,不符合正態(tài)分布的計量數據采用mannwhitneyu檢驗。計數資料用率表示,兩組間比較采用卡方檢驗。以α=0.05為檢驗水準。結果1.實驗組和對照組患者一般臨床情況的數據比較tprom組、pprom組、早產組、正常足月妊娠組產婦平均年齡分別為27.1士3.7歲、27.0士4.4歲、26.3士2.9歲、26.6士4.1歲。孕周分別為38.6±1.9周、30.2±1.3周、29.5±1.7周、38.9±1.4周。四組孕婦年齡比較差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);正常足月妊娠組與tprom組孕周比較,差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);早產組與pprom組孕周比較,差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。2.實驗組和對照組胎盤組織中pdia3蛋白的定位和表達在胎盤組織中,pdia3蛋白主要表達于細胞質,經sp染色呈黃色顆粒狀,pdia3蛋白在tprom組、pprom組、早產組、正常足月妊娠組胎盤組織中的陽性率分別為93.33%、90.00%、43.33%、60.00%,tprom組與正常足月妊娠組相比,pdia3蛋白的表達量明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);pprom組與早產組相比,pdia3蛋白的表達量明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。3.實驗組和對照組胎膜組織中pdia3蛋白的定位和表達在胎膜組織中,pdia3蛋白主要表達于細胞質,少量位于細胞核和細胞膜,經sp染色呈黃色顆粒狀,pdia3蛋白在tprom組、pprom組、早產組、正常足月妊娠組胎膜組織中的陽性率分別為86.67%、83.33%、46.67%、50.00%,tprom組與正常足月妊娠組相比,pdia3蛋白的表達量明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);pprom組與早產組相比,pdia3蛋白的表達量明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。4.實驗組和對照組胎盤組織中pdia3mrna的表達在胎盤組織中,pdia3mrna在tprom組、pprom組、早產組、正常足月妊娠組中的相對表達量分別是:2.025±0.180、2.012±0.188、0.995±0.278、0.958±0.418。tprom組與正常足月妊娠組相比,pdia3mrna的表達量明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);pprom組與早產組相比,pdia3mrna的表達量明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。5.實驗組和對照組胎膜組織中pdia3mrna的表達在胎膜組織中,pdia3mrna在tprom組、pprom組、早產組、正常足月妊娠組中的相對表達量分別是:1.440±0.053、1.452±0.056、1.035±0.035、1.024±0.049。tprom組與正常足月妊娠組相比,pdia3mrna的表達量明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);pprom組與早產組相比,pdia3mrna的表達量明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論PDIA3蛋白和mRNA在胎膜早破患者胎盤以及胎膜組織中的表達量升高,PDIA3可能通過多種途徑參與胎膜早破的發(fā)生、發(fā)展,是胎膜早破的一種可能的生物標記物。
【關鍵詞】：胎膜早破 胎盤組織 胎膜組織 PDIA3
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R714.433
【目錄】：

• 摘要4-8
• Abstract8-14
• 中英文縮略詞對照表14-15
• 1 引言15-17
• 2 材料和方法17-22
• 3 結果22-26
• 4 討論26-31
• 5 結論31-32
• 6 附圖32-35
• 參考文獻35-38
• 綜述部分 PDIA3蛋白的研究現狀38-49
• 參考文獻45-49
• 個人簡歷、在學期間發(fā)表的學術論文49-50
• 致謝50

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本文編號：810387