本文關鍵詞：MAP4調控滋養(yǎng)細胞遷移在子癇前期發(fā)病中作用的研究

  更多相關文章： 低氧 滋養(yǎng)細胞 MAP4 微管 黏著斑 遷移 子癇前期

【摘要】：背景和目的:子癇前期(pre-eclampsia,PE)是一個病因未明的復雜疾病,以母體高血壓、蛋白尿等為特征,約占妊娠婦女的5%-8%[1]。病情嚴重時,將導致母親子癇抽搐的發(fā)生以及胎兒宮內死亡。唯一確切的治療方式就是胎兒及其附屬物娩出,但卻增加了新生兒早產的發(fā)生率[2]。子癇前期治療效果不佳的癥結主要是其病因不明,目前的病因學研究主要集中在滋養(yǎng)細胞功能異常及早期胎盤形成不良。胎盤形成和胚胎植入是早期妊娠必經的過程,是妊娠延續(xù)中最重要的決定因素之一。滋養(yǎng)細胞的侵襲為胎盤形成奠定基礎,其侵襲程度決定了胎盤的穩(wěn)定性和胎盤與蛻膜結合的深度。同時,滋養(yǎng)細胞錨定子宮螺旋動脈確保了胎兒有足夠的氧和營養(yǎng)物質供應,當滋養(yǎng)細胞侵襲不足、局部功能障礙,將導致許多嚴重的產科并發(fā)癥發(fā)生,如流產、子癇前期、胎盤早剝、死胎等。而滋養(yǎng)細胞侵襲過度將導致滋養(yǎng)細胞疾病的發(fā)生,如侵襲性葡萄胎、絨毛膜癌等,對母體的生命造成傷害。因此,只有胚胎侵襲入母體與母體在這一過程中的自救相互平衡,胚胎才能得以順利孕育。早期胚胎中染色體核型異常時,大多數(90%)都被自然淘汰而流產了,而染色體核型正常的早期胚胎,大多數(93%)都繼續(xù)妊娠,顯著地體現了胚胎與母體之間的這一平衡[3]。因此,流產是滋養(yǎng)細胞侵襲失敗的結局,是自然質量控制的結果。所有影響滋養(yǎng)細胞侵襲和錨定在子宮螺旋動脈的因素,勢必決定著胚胎孕育的成敗。滋養(yǎng)細胞的侵襲受到胞內和胞外許多信號通路的精細調節(jié),涉及識別并消化細胞外基質、定向遷移等多個過程,其中,滋養(yǎng)細胞的定向遷移是侵襲行為的關鍵步驟。與絕大多數細胞遷移模式相同,滋養(yǎng)細胞的定向遷移包括細胞極化、偽足形成、基質粘連、尾部釋放、胞體收縮等多個環(huán)節(jié),而細胞骨架和粘連結構的動態(tài)重組是一個基礎環(huán)節(jié),也是各種因素調控滋養(yǎng)細胞遷移的重要靶點[4,5]。細胞骨架主要由微管和微絲組成,我們課題組前期研究發(fā)現,表皮生長因子(EGF)通過微絲結構重組刺激人滋養(yǎng)細胞遷移,而關于微管與滋養(yǎng)細胞遷移之間關系的研究較少。微管是具有極性的中空管狀結構,在細胞內的分布呈束網狀,并構成一個軌道運輸系統(tǒng),多種細胞物質如囊泡、細胞器等均順著其極性方向移動,并且,微管還參與中心粒等的裝配、細胞形態(tài)維持、細胞運動和分裂等過程[6,7]。微管骨架穩(wěn)定聚合的調節(jié)依賴于一系列結合于微管內、外側的微管結合蛋白(microtubule-associatedprotein,map),其中map4在人滋養(yǎng)細胞有表達,是促進滋養(yǎng)細胞微管穩(wěn)定延長的正性調節(jié)因素。微管在胞內的穩(wěn)定聚合、延長方向可以精確地指向細胞與胞外基質粘連的粘著斑部位,微管向粘著斑移動與細胞周圍的粘著斑溶解有關。對于遷移的細胞,依賴微管的粘著斑溶解對于分解細胞后方粘著斑十分重要[8]。jeg-3細胞來源于人絨毛膜癌組織,其形態(tài)、生化標志、功能等細胞特征與絨毛組織原代培養(yǎng)的滋養(yǎng)細胞最為相似。因此,本實驗用jeg-3細胞研究人滋養(yǎng)細胞的遷移和可能機制。實驗方法:第一部分:缺氧通過map4對滋養(yǎng)細胞遷移的調控及機制的研究1.常氧和低氧培養(yǎng)滋養(yǎng)細胞,根據缺氧時間將細胞分為五組0h、6h、12h、18h、24h組;2.transwell法分析滋養(yǎng)細胞侵襲性遷移能力;3.免疫熒光染色分析滋養(yǎng)細胞內微管、黏著斑結構變化;4.western-blot法檢測蛋白表達的變化;5.使用excel及spss軟件整理數據。第二部分:map4、細胞骨架蛋白在子癇前期患者胎盤組織中的表達1.搜集選取第三軍醫(yī)大學第三附屬醫(yī)院(大坪醫(yī)院)產科2013年01月—2014年03月收治的重度子癇前期患者(pe組)20例和正常晚孕患者(control組)20例行擇期剖宮產后的胎盤組織;2.通過組織he染色研究實驗組和對照組胎盤組織中絨毛和血管的差異;3.通過組織免疫組化研究胎盤絨毛組織中相關分子的定位及表達;4.提取胎盤絨毛相關蛋白,行western-blot分析其表達量。結果:1.低氧抑制滋養(yǎng)細胞侵襲,6h組與0h組比較,侵襲能力明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);隨著缺氧時間的延長,滋養(yǎng)細胞侵襲能力進一步降低,12h組與0h組、6h組比較,18h組與12h組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(p0.05);2.隨著缺氧時間延長,map4、微管蛋白表達逐漸降低,微管逐漸解聚、黏著斑逐漸聚合,黏著斑蛋白表達逐漸增多;3.與正常對照組相比,pe組胎盤組織血管痙攣、閉塞、血流量減少;4.與正常對照組相比,PE組胎盤組織中微管蛋白和MAP4蛋白表達較少、黏著斑蛋白表達較多,與滋養(yǎng)細胞低氧環(huán)境中表達一致。結論:1.低氧環(huán)境中,MAP4的變化可能通過影響細胞骨架中微管的聚合和黏著斑的形態(tài)調控滋養(yǎng)細胞遷移;2.PE患者胎盤組織血管痙攣、閉塞、血流量減少,絨毛發(fā)育不良,可能與局部血管病變有關,為臨床胎盤缺血缺氧提供了直接證據。同時,PE患者胎盤組織中MAP4、α-tubulin、vinculin蛋白表達異常,可能為胎盤局部缺血奠定基礎,為子癇前期的病因學研究提供佐證。
【關鍵詞】：低氧 滋養(yǎng)細胞 MAP4 微管 黏著斑 遷移 子癇前期
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R714.244
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 英文摘要6-10
• 中文摘要10-13
• 第一章 前言13-17
• 第二章 缺氧通過MAP4對滋養(yǎng)細胞遷移的調控及機制的研究17-34
• 2.1 材料與方法17-26
• 2.2 結果26-31
• 2.3 討論31-33
• 2.4 小結33-34
• 第三章 MAP4、細胞骨架蛋白在子癇前期患者胎盤組織中的表達34-46
• 3.1 材料和方法34-39
• 3.2 結果39-44
• 3.3 討論44-45
• 3.4 小結45-46
• 全文結論46-47
• 參考文獻47-50
• 文獻綜述 子癇前期發(fā)病機制的研究進展50-59
• 參考文獻55-59
• 研究生期間發(fā)表的文章59-60
• 致謝60

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1 郭麗娜;影響滋養(yǎng)細胞侵蝕能力的因素及其與妊高征的關系[J];國外醫(yī)學.婦幼保健分冊;2003年01期

2 王鴻艷;滋養(yǎng)細胞與妊娠高血壓綜合征發(fā)病的關系[J];實用醫(yī)學雜志;2003年03期

3 周純芝,楊通明,唐石初,吳澤惠,劉世平;彩色多普勒血流顯像對滋養(yǎng)細胞腫瘤化療前后應用的研究[J];浙江實用醫(yī)學;2004年02期

4 胡蓉,李笑天,張煒;氧對滋養(yǎng)細胞功能的調節(jié)與妊高征[J];國外醫(yī)學.婦產科學分冊;2004年03期

5 孫云燕,豐有吉,鹿欣;滋養(yǎng)細胞與妊娠高血壓綜合征研究進展[J];國外醫(yī)學.婦產科學分冊;2004年02期

6 王莉,劉風花;數字減影血管造影在滋養(yǎng)細胞腫瘤早期診斷中的應用[J];鄭州大學學報(醫(yī)學版);2004年05期

7 Carlini L.;Villa A.;Busci L. ;朱國棟;;選擇性子宮動脈栓塞:低風險妊娠滋養(yǎng)細胞疾病的新療法[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(婦產科學分冊);2006年11期

8 李利玲;喬福元;;滋養(yǎng)細胞浸潤調控因子與妊娠期高血壓疾病[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2007年10期

9 黃玲玲;王素梅;唐卉;;鎂離子對滋養(yǎng)細胞在不同培養(yǎng)環(huán)境中生存能力的影響[J];中華婦幼臨床醫(yī)學雜志(電子版);2010年04期

10 周寶琴;滋養(yǎng)細胞腫瘤化療失敗44例的原因分析[J];交通醫(yī)學;1995年02期

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1 白懷;劉興會;范平;張娟;羅薛峰;;微電場影響滋養(yǎng)細胞遷移行為及機制[A];中華醫(yī)學會第三次全國妊娠期高血壓疾病學術研討會論文匯編[C];2011年

2 張瑞祥;劉勝;韓麗;馬衛(wèi)軍;王峰;齊潔敏;鄭紀寧;洪淑英;劉樹森;;“中間型”滋養(yǎng)細胞的超微結構與免疫組化[A];第八次全國電子顯微學會議論文摘要集（Ⅰ）[C];1994年

3 王及氓;王莉;姚元慶;;人白細胞抗原-G對滋養(yǎng)細胞遷移的作用研究[A];中華醫(yī)學會第十次全國婦產科學術會議產科會場（產科學組、妊高癥學組）論文匯編[C];2012年

4 郭培奮;賀銀燕;李大金;;人早孕滋養(yǎng)細胞表達胸腺基質淋巴細胞生成素及其受體[A];第一屆中華醫(yī)學會生殖醫(yī)學分會、中國動物學會生殖生物學分會聯合年會論文匯編[C];2007年

5 周曉宇;劉霞;金小英;彭華;李琦偉;鐘少平;鄒麗;;血清剝奪對滋養(yǎng)細胞生物行為的影響及其機制研究[A];2011年浙江省婦產科學學術年會暨“婦產科常見疾病的臨床研究新進展”學習班論文匯編[C];2011年

6 張弘;林其德;;妊娠高血壓綜合征患者滋養(yǎng)細胞浸潤相關基因及其蛋白表達[A];澳門、香港、內地生殖健康研討會論文集[C];2004年

7 周純芝;楊通明;唐石初;吳澤惠;劉世平;彭季蘭;程智;;彩色多普勒血流顯像對滋養(yǎng)細胞腫瘤化療前后應用研究[A];中華醫(yī)學會第六次全國超聲醫(yī)學學術年會論文匯編[C];2001年

8 黃煜;李大金;;趨化因子CXCL16對早孕期人滋養(yǎng)細胞生物學功能的自分泌調控作用[A];首屆滬浙婦產科學術論壇暨2006年浙江省婦產科學學術年會論文匯編[C];2006年

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