本文關鍵詞：不同來源人子宮內膜在裸鼠腹腔內的動態(tài)變化及種植情況比較，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:子宮內膜異位癥發(fā)病機制目前仍不清楚,Sampson提出的“經血逆流內膜種植”學說能解釋內異癥大多數臨床表現而廣為接受,但Sampson學說始終不能解釋為何90%以上婦女有經血逆流,但僅有10%的婦女發(fā)病?近年來,郎景和提出在位內膜的內在特性決定了逆流內膜在腹腔的“命運”,即種植形成異位病灶或逐漸死亡而被清除,逆流內膜經過3A模式(侵襲-粘附-血管形成)而在異位種植存活而形成異位病灶。而內膜在異位建立新的血供需48h-72,可見內膜進入腹腔早期(72h內)的組織活性是決定其能否在異位種植存活關鍵之一。但由于倫理學原因,不能在短期內對同一患者進行多次腹腔鏡檢查,逆流內膜在人體腹腔內的早期變化至今仍不清楚。人子宮內膜異位癥裸鼠模型能很好地再現子宮內膜在光滑的腹膜種植的過程,且裸鼠遺傳背景明確、穩(wěn)定,不發(fā)生免疫排斥反應,復制率高,能保持人子宮內膜移植物固有的組織學形態(tài)和生物學特性。實驗重復性強,專一性好,是建立人子宮內膜異位癥的理想動物模型。而目前裸鼠EM模型的建立大多采用正常婦女非月經期子宮內膜,很少關注內異癥婦女月經期自然脫落子宮內膜在腹腔的種植狀態(tài)。本研究以T細胞免疫功能缺陷BALB/C(nu/nu)裸鼠為實驗載體,通過不同方法采集的內異癥婦女及正常婦女子宮內膜,建立“人子宮內膜異位癥裸鼠模型”,探討不同來源子宮內膜在裸鼠腹腔內的動態(tài)變化及其對裸鼠子宮內膜異位癥模型建立的影響,為建立理想EMs動物模型提供依據,進一步揭示子宮內膜在腹膜的種植過程。方法:選擇具備手術指征的內異癥和非內異癥(術后病理證實為子宮良性病變、子宮內膜正常)患者各24例,分別采集月經期自然脫落內膜、月經期刮取內膜以及術中刮取非月經期內膜分組。實驗分兩部分進行:第一部分:月經期子宮內膜在裸鼠腹腔內的動態(tài)變化。分別采集內異癥及非內異癥婦女月經期子宮內膜,每組各8位患者,采集脫落子宮內膜后腹腔注射法建立裸鼠子宮內膜異位癥模型,于建模后24,48,72小時處死各組裸鼠,觀察兩組內膜進入腹腔后早期組織活性(HS)動態(tài)變化。第二部分:不同來源的內膜對人子宮內膜異位癥裸鼠模型建立的影響。將兩組各16名患者根據有無內異癥及內膜采集方法分6組:內異癥婦女月經期自然脫落內膜組(Endometriosis+shedding,EMsh),內異癥婦女月經期刮取內膜組(Endometriosis+scoraping,EMsc),內異癥婦女增生期刮取內膜組(Endometriosis+proliferative stage,EMpr);非內異癥婦女(正常)月經期自然脫落內膜組(Normal+shedding,NOsh),非內異癥婦女月經期刮取內膜組(Normal+scoraping,NOsc),非內異癥婦女增生期刮取內膜組(Normal+proliferative stage,EMpr)。建模鼠根據內膜來源對應分為:EMsh、EMsc、EMpr、NOsh、NOsc、NOpr組。于內膜注射后第8天處死各組裸鼠,觀察內膜的腹腔種植情況及各組建模成功率和病灶負荷情況,采集病灶并進行組織學分析。結果:第一部分:內膜腹腔注射后的第1天(d1),兩組子宮內膜碎片大多游離于裸鼠腹腔內,組織水腫,體積略增大蒼白,僅少數粘附于腸系膜、膀胱旁脂肪墊等處,但粘附不牢固,用吸取少量生理鹽水的吸管輕輕吹打,碎片即可脫離;第2天(d2),組織仍水腫,蒼白,兩組均見少數子宮內膜碎片粘附于腹膜及子宮系膜等處,吸管吹打不易脫離;第3天(d3),游離內膜與粘附內膜共存,游離內膜表面仍蒼白,體積縮小,萎縮狀態(tài),部分內膜牢固粘附與腹膜內,色澤鮮亮,周圍可見稀疏新生血管形成(圖2)。比較兩組內膜腹腔注射前(0h)、注射后24h、48h、72h組織活性。發(fā)現兩組月經期內膜均有不同程度損傷,腺體結構部分破壞,間質細胞減少,炎性細胞浸入,但內異癥組內膜損傷程度相對較輕,而非內異癥組相對較重,方差分析發(fā)現內異癥組月經期內膜組織評分(HS)高于非內異癥組(P0.05)。內膜進入腹腔后隨著時間推移內膜腺體結構破壞加重,間質細胞數量減少,溶解壞死細胞增多,重復測量方差分析,EMS組HS高于NOR組,差異顯著(F=143.3,P=000);兩組內膜注射后不同時間HS逐漸下降,差異顯著(F=236.0,P=000)(圖3)。第二部分:各組均有成功建模鼠,但各組建模成功率及病灶負荷不同。內異癥各組與非內異癥各組對應比較:卡方檢驗比較各組建模成功率:EMsh組與Nosh組相比,差異顯著(卡方值=3.895,p=0.048);內異癥組內相比,差異無顯著性;正常內膜各組比較,差異無顯著性。方差分析比較各組CSA:內異癥組與正常組相比,EMsh組高于Nosh(p=0.006),EMsc組高于NOsc組(P=0.026);內異癥組內相比,差異無顯著性;正常內膜組內比較:NOpr組病灶負荷高于Nosh組(P=0.031);NOsc組病灶負荷高于Nosh組(P=0.018)。結論:結合以上幾種情況的結果得出“月經期自然脫落內膜建立動物模型能很好地再現內異癥婦女與非內異癥婦女內膜在腹腔的種植差別”,是研究內異癥發(fā)病機制的理想動物模型。
【關鍵詞】：子宮內膜異位癥 月經期內膜 組織活性 動物模型
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R711.71
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-11
• 引言11-13
• 第一部分 月經期子宮內膜在裸鼠腹腔內的動態(tài)變化13-22
• 材料與方法13-15
• 結果15-20
• 討論20-21
• 結論21-22
• 第二部分 不同來源的內膜對人子宮內膜異位癥裸鼠模型建立的影響22-30
• 材料與方法22-24
• 結果24-28
• 討論28-29
• 結論29-30
• 參考文獻30-32
• 綜述32-43
• 參考文獻39-43
• 中英文對照縮略詞表43-44
• 攻讀碩士期間公開發(fā)表的論文和科研成果44-45
• 致謝45-46

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