目的:缺血再灌注損傷是引起急性腎損傷的重要原因。妊娠期急性腎損傷(Pregnancy-related acute kidney injury,Pr-AKI)是孕產(chǎn)婦嚴重的并發(fā)癥之一。在腎臟缺血再灌注損傷的過程中,炎癥反應、腎小管上皮細胞壞死、凋亡和自噬等發(fā)揮了重要作用。我們通過查閱文獻發(fā)現(xiàn)microRNAs(miRNAs)與腎臟缺血再灌注損傷密切相關。microRNAs是真核生物中的一類內(nèi)源性的具有調(diào)控功能的非編碼RNA,具有參與細胞增殖、細胞凋亡、炎癥發(fā)生等生物學功能。已有研究表明miRNAs與缺血再灌注損傷密切相關。本研究主要目的是探討miR-27a通過靶向TLR4調(diào)節(jié)妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注損傷機制。研究方法:構建妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型,應用基因芯片篩選腎臟缺血再灌注后差異性表達的miRNAs。應用聚合酶鏈反應(Polymerase chain reaction,PCR)檢測驗證基因芯片篩選出的缺血再灌注損傷的腎臟組織中差異表達的miRNAs。通過生物學軟件預測miR-27a同TLR4的結合位點,并通過雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)驗證miR-27a可以特異性結合TLR4 mR...

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 :妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型建立及microRNA-27a篩選及鑒定
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要儀器及試劑
        2.2 研究方法
        2.3 統(tǒng)計學分析
    3 結果
        3.1 妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注腎功能的變化
        3.2 妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注mi RNAs的芯片篩選
        3.3 RT-PCR驗證芯片篩選差異表達的mi RNAs
    4 討論
    5 結論
第二部分 :microRNA-27a在NRK-52E細胞中對TLR4通路調(diào)控作用的研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要儀器及試劑
        2.2 研究方法
        2.3 統(tǒng)計學分析
    3 結果
        3.1 通過報告基因驗證miR-27a和TLR4的結合位點
        3.2 miR-27a抑制NRK52E細胞中TLR4的表達
        3.3 miR-27a對 NRK52E細胞增殖和凋亡功能的調(diào)節(jié)
    4 討論
    5 結論
第三部分 :microRNA-27a通過TLR4通路調(diào)控腎臟缺血再灌注損傷的體內(nèi)研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要儀器及試劑
        2.2 研究方法
        2.3 統(tǒng)計學分析
    3 結果
        3.1 腎臟缺血再灌注損傷模型中miR-27a和TLR4表達的相關性
        3.2 TLR4加劇妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注損傷
        3.3 mi R-27a可通過靶向TLR4 減輕妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注損傷
    4 討論
    5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3887144