目的:研究人白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體-1(LAIR-1)對(duì)卵巢癌細(xì)胞HO8910線粒體能量代謝的影響。方法:利用低氧模擬劑CoCl₂處理細(xì)胞,分析缺氧對(duì)LAIR-1表達(dá)的影響;利用LAIR-1慢病毒RNAi干擾載體(LAIR-1-RNAi-lentivirus),下調(diào)LAIR-1在卵巢癌HO8910細(xì)胞中的表達(dá)。Western blot、qRT-PCR法鑒定HO8910慢病毒感染后LAIR-1的表達(dá)水平;通過(guò)CCK-8實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證下調(diào)LAIR-1表達(dá)對(duì)HO8910細(xì)胞生長(zhǎng)的影響;通過(guò)Seahorse生物能量分析儀,檢測(cè)下調(diào)LAIR-1表達(dá)后對(duì)HO8910細(xì)胞生物能量代謝的影響。結(jié)果:在低氧環(huán)境下,HO8910細(xì)胞的LAIR-1表達(dá)顯著上調(diào);LAIR-1-RNAi-lentivirus轉(zhuǎn)染后,HO8910細(xì)胞的LAIR-1表達(dá)顯著下調(diào),細(xì)胞生長(zhǎng)能力明顯增強(qiáng)(P<0.01);LAIR-1表達(dá)顯著下調(diào)的HO8910細(xì)胞,ATP產(chǎn)生明顯改善(P<0.001),同時(shí)其基礎(chǔ)呼吸(P<0.001)和最大呼吸能力(P<0.001)均明顯提...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 化學(xué)缺氧模型的建立
        1.2.2 慢病毒轉(zhuǎn)染及LAIR-1干擾細(xì)胞株構(gòu)建
        1.2.3 Western blot檢測(cè)LAIR-1在HO8910細(xì)胞中的表達(dá)
        1.2.4 qRT-PCR檢測(cè)LAIR-1在HO8910細(xì)胞中mRNA水平表達(dá)
        1.2.5 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖
        1.2.6 克隆形成實(shí)驗(yàn)
        1.2.7 XF96耗氧量測(cè)定
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié) 果
    2.1 缺氧環(huán)境對(duì)HO8910細(xì)胞LAIR-1表達(dá)的影響
    2.2 LAIR-1干擾細(xì)胞株的構(gòu)建及鑒定
    2.3 LAIR-1-RNAi慢病毒轉(zhuǎn)染后HO8910細(xì)胞生長(zhǎng)能力的變化
    2.4 LAIR-1對(duì)HO8910細(xì)胞線粒體生物能量代謝的影響
3 討 論



本文編號(hào)：3885764