目的研究米非司酮在子宮內(nèi)膜癌中的功能和潛在分子機(jī)制。方法通過細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)研究不同質(zhì)量濃度(10、50、100μg/m L)米非司酮以及隨著時間變化米非司酮對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的影響;蛋白免疫印記實(shí)驗(yàn)及免疫熒光實(shí)驗(yàn)研究米非司酮(50μg/m L)對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞內(nèi)外泌體分泌、外泌體調(diào)控關(guān)鍵蛋白的表達(dá)、外泌體關(guān)鍵調(diào)控蛋白對外泌體分泌的影響。結(jié)果隨著加入子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞內(nèi)的米非司酮質(zhì)量濃度升高和時間推移,子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖速率顯著減慢,同時細(xì)胞狀態(tài)變差,數(shù)目顯著減少;米非司酮顯著降低外泌體蛋白胞外分泌,包括外泌體總蛋白以及標(biāo)志蛋白CD63和Gp96等,使其滯留在胞內(nèi);米非司酮顯著降低外泌體分泌調(diào)控蛋白Rab27a和Rab27b的表達(dá);敲低外泌體分泌調(diào)控蛋白Rab27a和Rab27b的表達(dá)顯著降低外泌體總蛋白以及標(biāo)志蛋白CD63的胞外分泌。結(jié)論米非司酮通過抑制外泌體分泌調(diào)控蛋白Rab27a和Rab27b的表達(dá),從而抑制外泌體分泌,最終導(dǎo)致子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖顯著減慢。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 細(xì)胞
    1.2 試劑
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 轉(zhuǎn)染
    2.3 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
    2.4 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
    2.5 實(shí)時熒光定量PCR(q RT-PCR）實(shí)驗(yàn)
    2.6 蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)
    2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 米非司酮抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖
    3.2 米非司酮抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞外泌體分泌
    3.3 米非司酮通過調(diào)控Rab27a和Rab27b的表達(dá)從而調(diào)控外泌體分泌
    3.4 敲低Rab27a和Rab27b的表達(dá)可顯著抑制外泌體分泌
4 討論



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