Beclin1在宮頸癌SiHa細(xì)胞中對(duì)PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路的影響研究
發(fā)布時(shí)間:2023-03-12 18:51
目的:探討B(tài)eclin1對(duì)宮頸癌SiHa細(xì)胞中p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表達(dá)的影響。方法:用lipofectamine 2000將Beclin1基因的表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1(+)-Beclin1和干擾質(zhì)粒pSUPER-Beclin1轉(zhuǎn)染SiHa細(xì)胞,設(shè)置實(shí)驗(yàn)組((1):pcDNA3.1(+)-Beclin1;(2):pSUPER-Beclin1)、陰性對(duì)照組((3):pcDNA3.1(+)空載組;(4):pSUPER空載組)、空白對(duì)照組((5)組),用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)各組Beclin1的mRNA表達(dá)情況。在轉(zhuǎn)染成功后的48h提取各組細(xì)胞總RNA,72h提取細(xì)胞總蛋白,分別用qRT-PCR和Western blot技術(shù)檢測(cè)p-PI3K、p-AKT、p-mTOR在mRNA和蛋白水平的表達(dá)情況。結(jié)果:1.在SiHa細(xì)胞中轉(zhuǎn)染Beclin1的表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1(+)-Beclin1和干擾質(zhì)粒pSUPER-Beclin1后,qRT-PCR檢測(cè),結(jié)果顯示過(guò)表達(dá)組中的Beclin1的mRNA水平明顯增高,沉默組中的Beclin1的mRNA水平明顯降低,說(shuō)明轉(zhuǎn)染成功。2....
【文章頁(yè)數(shù)】:48 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
常用縮寫詞中英文對(duì)照表
前言
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果
2.1 qRT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后Beclin1的mRNA的變化
2.2 過(guò)表達(dá)Beclin1后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表達(dá)情況
2.3 沉默Beclin1后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表達(dá)情況
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間參與的科研課題與研究成果
個(gè)人簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):3761760
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1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果
2.1 qRT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后Beclin1的mRNA的變化
2.2 過(guò)表達(dá)Beclin1后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表達(dá)情況
2.3 沉默Beclin1后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表達(dá)情況
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4 結(jié)論
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