目的:地中海貧血是危害嚴重的遺傳性溶血性疾病。重型β-地中海貧血需要終生依賴輸血和祛鐵治療,治療費用昂貴,死亡率極高,給病人、家庭和社會帶來巨大的負擔。對高危夫婦實施胎兒產(chǎn)前診斷是避免重型患兒出生的唯一有效途徑。目前國內外對地中海貧血的產(chǎn)前診斷方法主要是有創(chuàng)的產(chǎn)前診斷技術,不可避免會存在對母體和胎兒的傷害。因此,安全有效的無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷技術一直是地中海貧血等遺傳性疾病產(chǎn)前診斷研究的方向和目標。本研究擬應用高通量目標區(qū)域捕獲測序和假四倍體基因型生物信息分析方法,對高危孕婦血漿游離胎兒DNA實施β-地中海貧血基因突變檢測,探討創(chuàng)建安全、有效和準確的無創(chuàng)性產(chǎn)前檢測體系,為β-地中海貧血產(chǎn)前診斷提供新的技術和實施方法。方法:課題選取的研究對象為雙方均攜帶β-地中海貧血基因突變,可能生育重型β-地中海貧血患兒的夫婦。孕婦孕周為12周-26周、單活胎、擬進行胎兒產(chǎn)前診斷。對孕婦實施絨毛膜穿刺、羊膜腔穿刺或臍靜脈穿刺,提取胎兒DNA,應用反向斑點雜交法和熒光PCR溶解曲線法進行胎兒DNA地中海貧血基因診斷。同時采集孕婦外周血,提取血漿游離DNA。設計針對中國人群常見的12種β-地中海貧血基因突變類型... 

【文章頁數(shù)】：139 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
個人簡歷
中文摘要
英文摘要
中英文縮略語
一、前言
二、實驗設計及技術路線
三、實驗方法
    第一部分：標本的采集和保存
    第二部分：有創(chuàng)方法獲取胎兒DNA進行β-地中海貧血基因分析
    第三部分：孕婦外周血游離DNA的提取及文庫構建、孕婦配偶基因組DNA文庫構建
    第四部分：基于目的基因捕獲的高通量測序
    第五部分：假四倍體基因型生物信息分析
    第六部分：本研究無創(chuàng)產(chǎn)前檢測方法效能評估
四、實驗結果
    第一部分：臨床資料、孕婦外周血游離DNA文庫濃度結果
    第二部分：有創(chuàng)方法檢測胎兒β-地中海貧血基因型結果
    第三部分：孕婦外周血游離DNA文庫質量檢測結果
    第四部分：基于目的基因捕獲的高通量測序結果
    第五部分：假四倍體基因型生物信息分析結果
    第六部分：本研究無創(chuàng)產(chǎn)前檢測方法效能評估結果
五、討論
六、結論
七、本課題創(chuàng)新性
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學術論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]高齡孕婦唐氏綜合征篩查和診斷的研究進展[J]. 張姣,張斌.  中國生育健康雜志. 2014 (01)
[2]孕婦外周血單個胎兒有核紅細胞在β地中海貧血產(chǎn)前基因診斷中的應用[J]. 韋紅英,龍桂芳,林偉雄,李樹全.  中華兒科雜志. 2007(12)
[3]單因子利率模型的極大似然估計——對中國利率的實證分析[J]. 潘冠中,邵斌.  財經(jīng)研究. 2004(10)

碩士論文
[1]孕婦外周血中胎兒有核紅細胞的分離與鑒定[D]. 謝林.華南理工大學 2016



本文編號：3703919