目前認(rèn)為，卵巢癌化療耐受與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的發(fā)生有著密切關(guān)系。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時(shí)調(diào)控細(xì)胞存活或死亡的信號(hào)傳遞有多條途徑。我們的前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PERK-KEAP1-Nrf2途徑參與人卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑的耐受，因此，我們利用氧化應(yīng)激誘導(dǎo)劑VK3觀察其對(duì)SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞的影響，探討PERK-ATF4-CHOP途徑在SKOV3凋亡及SKOV3/DDP耐藥中的作用，進(jìn)一步闡明腫瘤化療耐藥的機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)使用氧化應(yīng)激誘導(dǎo)劑VK3模擬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型，采用MTT,流式細(xì)胞術(shù)的方法比較人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3和卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞株SKOV3/DDP的存活率及凋亡率的差異，又通過Western Blot技術(shù)檢測(cè)PERK-ATF4-CHOP途徑各相關(guān)蛋白的表達(dá)，結(jié)果說明：經(jīng)過VK3處理的SKOV3細(xì)胞和SKOV3/DDP細(xì)胞存活率存在明顯差異，SKOV3/DDP細(xì)胞對(duì)VK3有較強(qiáng)的耐藥性。PERK-ATF4-CHOP途徑各相關(guān)蛋白在SKOV3中表達(dá)量明顯多于SKOV3/DDP細(xì)胞，導(dǎo)致SKOV3細(xì)胞發(fā)生了PERK-ATF4-CHOP途徑介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡；而SKOV3/DDP細(xì)胞則沒有發(fā)生此途徑介導(dǎo)的凋亡。因... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

MTT法檢測(cè)VK3對(duì)兩種細(xì)胞存活率的影響

2圖 2.3 VK3 對(duì) SKOV3 細(xì)胞和 SKOV3/DDP 細(xì)胞 caspase4、cleaved-caspase4 表達(dá)的影響(A)Western blot analysis for the expression of caspase4 and cleaved-caspase 4proteins in SKOV3 cells and SKOV3/DDP cells treated withVK3.(B)Quantitatioof proteins level.（Data were presented as a mean±SD.n=3. P<0.01.）

21圖 2. 4 Western blot 方法檢測(cè) P-eIF2α、ATF4、CHOP 蛋白含量的變化 (A)Western blot analysis for P-eIF2α/ATF4/CHOP protein in SKOV3 andSKOV3/DDP cells treated with 15μM VK3. (B)Quantitation of P-eIF2α/ATF4/CHOP protein level. （ Data were presented as a mean ±SD,n=3,P<0.05.）


本文編號(hào)：3549491