背景:盆腔器官脫垂（pelvic organ prolapse,POP）是指盆腔器官脫出于陰道內(nèi)或陰道外,嚴重影響患者生活質(zhì)量。POP是一種多病因疾病,如陰道分娩次數(shù)、年齡、體重指數(shù)等均被認為與POP的發(fā)生相關。基因缺陷導致盆底細胞外基質(zhì)結構及功能異常是女性POP發(fā)生發(fā)展的重要分子基礎。膠原纖維和彈力纖維作為細胞外基質(zhì)的重要組成部分,以筋膜、韌帶等形式給予盆底組織抗拉伸強度,在維持盆底器官正常位置和功能中發(fā)揮重要作用。盆底韌帶和筋膜主要細胞是成纖維細胞。微小RNA（microRNA,miRNA）為長度約19-22個核苷酸的非編碼RNA,在轉錄后調(diào)控基因表達。miR-200b已被確認參與多種纖維化疾病,如肺纖維化、腎臟纖維化和心臟纖維化等。目的:探討microRNA-200b在體外原代及傳代培養(yǎng)的盆腔器官脫垂患者子宮旁骶韌帶成纖維細胞中的表達,進而為盆腔器官脫垂的發(fā)病機制和未來的治療提供可行的理論基礎與方法指導。方法:1.收集因盆腔器官脫垂（根據(jù)盆腔脫垂定量分期法II期或以上）行子宮切除術患者的子宮旁骶韌帶標本10例作為實驗組,收集無盆腔器官脫垂行子宮切除術患者子宮旁骶韌帶標本10例作為... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

對照組與實驗組人子宮旁骶韌帶成纖維細胞生長狀態(tài)（倒置相差顯微鏡×100）1

結果9結果1成纖維細胞形態(tài)學觀察對照組與實驗組種植同數(shù)量細胞培養(yǎng)15天后，觀察貼壁的人子宮旁骶韌帶成纖維細胞多呈長梭形，彼此連接密集排列，呈旋渦狀或放射狀排列，境界清楚，胞體較大，胞質(zhì)透明，細胞核較大，多呈橢圓形，與正常子宮旁骶韌帶成纖維細胞相比，盆腔器官脫垂子宮旁骶韌帶成纖維細胞數(shù)量較少，較稀疏。(結果如圖1所示)圖1對照組與實驗組人子宮旁骶韌帶成纖維細胞生長狀態(tài)（倒置相差顯微鏡×100）12細胞的免疫組化鑒定波形蛋白（Vimentin）染色結果示，倒置相差顯微鏡下觀察，圍繞細胞核周圍呈現(xiàn)棕黃色顆粒狀，定位于胞質(zhì)內(nèi)，細胞核不染色，呈藍色，證明為成纖維細胞。（結果如圖2所示）圖2人子宮旁骶韌帶成纖維細胞免疫組化染色（倒置相差顯微鏡×400）21圖A為正常子宮旁骶韌帶成纖維細胞，圖B為盆腔器官脫垂子宮旁骶韌帶成纖維細胞。2圖A為正常子宮旁骶韌帶成纖維細胞，圖B為盆腔器官脫垂子宮旁骶韌帶成纖維細胞。ABAB

青島大學碩士學位論文103細胞的免疫熒光鑒定由于成纖維細胞高表達Vimentin，我們在激光共聚焦顯微鏡下觀察結果顯示，在成纖維細胞的胞漿中，可見Vimentin陽性的細胞發(fā)出彌漫性強綠色熒光，證明我們所培養(yǎng)的細胞為成纖維細胞，再通過DAPI染細胞核可以計算總的細胞數(shù)。（結果如圖3所示）圖3人子宮旁骶韌帶成纖維細胞免疫熒光染色（激光共聚焦顯微鏡×400）34實驗組與對照組相關特征比較我們對實驗組及正常對照組在年齡、體重指數(shù)、盆腔器官脫垂家族史人數(shù)比例、絕經(jīng)期人數(shù)比例及正常自然分娩情況之間采用相關統(tǒng)計學方法比較差異無統(tǒng)計學意義（P均>0.05）,說明這20例樣本組間匹配良好，具有可比性。結果如下表6所示。表6實驗組與對照組患者相關臨床特征比較相關特征實驗組對照組P（n=10）（n=10）年齡51.40±3.8149.30±3.500.215體重指數(shù)24.85±1.7824.09±1.880.362盆腔器官脫垂家族史（人數(shù)（%））3（30.00）1（10.0）0.582絕經(jīng)期（人數(shù)（%））5（50.00）3（30.00）0.650正常自然分娩數(shù)1.70±0.671.30±0.650.2025兩組患者miR-200b基因表達量比較我們獲得的溶解曲線為單峰曲線，記錄兩組實驗樣本miR-200b與U6對應的Ct值，進行計算，使用2-△△Ct來表示miR-200b基因在實驗組與對照組中的表達差異，2-△△Ct〉1，表示miRNA的表達水平上調(diào)，反之，2-△△Ct〈1，表示miRNA的表達水平下調(diào)。我們的實驗結果表明，盆腔器官脫垂患者子宮旁骶韌帶成纖維細胞與非盆腔器官脫垂患者子宮旁骶韌帶成纖維細胞相比，2-△△Ct〉1，表示表達水平上調(diào)，且P〈0.01，3圖A正常子宮旁骶韌帶成纖維細胞，圖B為盆腔器官脫垂子宮旁骶韌帶成纖維細胞。AB


本文編號：3543990