目的:探討宮頸癌HeLa細胞外泌體對細胞遷移、侵襲及Wnt/β-連環(huán)蛋白（β-catenin）信號通路的影響,闡明其外泌體在宮頸癌發(fā)生發(fā)展過程中的可能作用機制。方法:取對數(shù)生長期宮頸癌HeLa細胞,采用超速離心法分離宮頸癌HeLa細胞外泌體,透射電鏡下觀察外泌體形態(tài)表現(xiàn),Western blotting法檢測外泌體標志蛋白CD63和CD81的表達,鑒定分離出來的外泌體。將HeLa細胞分為外泌體組（Exo組）和對照組,2組細胞分別用含和不含HeLa細胞外泌體的培養(yǎng)基培養(yǎng)。共聚焦顯微鏡下觀察HeLa細胞攝取外泌體情況,其中外泌體采用PKH26熒光標記,HeLa細胞用DAPI熒光進行核染色,Transwell小室實驗檢測細胞侵襲能力,細胞劃痕實驗測定細胞遷移能力,Western blotting法檢測細胞中Wnt1、β-catenin和T細胞因子4 （TCF4）蛋白表達水平。結(jié)果:透射電鏡下觀察,HeLa細胞中分離的外泌體為是圓形或橢圓形、直徑為40～100nm的囊泡狀小體,且富含CD63和CD81蛋白。共聚焦顯微鏡下觀察,Exo組HeLa細胞膜表面有外泌體附著,而對照組HeLa細胞膜表面無... 

【文章來源】：吉林大學學報(醫(yī)學版). 2020,46(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

電鏡下觀察HeLa細胞來源外泌體形態(tài)表現(xiàn)

HeLa細胞外泌體采用PKH26熒光標記（PKH26染劑不影響外泌體特性，且可與外泌體膜結(jié)構(gòu)穩(wěn)定結(jié)合發(fā)出紅色熒光），HeLa細胞用DAPI熒光進行核染色，培養(yǎng)24h，共聚焦熒光顯微鏡觀察，對照組HeLa細胞膜表面無標記外泌體附著，Exo組HeLa細胞膜表面有標記的外泌體附著。見圖3（插頁七）。2.3 2組HeLa細胞中侵襲細胞數(shù)

與對照組比較，Exo組HeLa細胞遷移距離明顯增加（P<0.01）。見表1和圖5。2.5 2組HeLa細胞中Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白表達水平

【參考文獻】：
期刊論文
[1]食管癌細胞來源的外泌體對腫瘤細胞遷移及侵襲能力的影響及機制研究[J]. 林鋒,王海娟,李春曉,李慧,王婷,南鵬,錢海利,詹啟敏.  解放軍醫(yī)學雜志. 2017(04)
[2]宮頸癌細胞分泌外泌體介導上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化提高癌前細胞侵襲能力的體外研究[J]. 易紅艷,周琛斐,梁莉,王薇,魏文斐,陳曉靜,吳湘光,嚴瑞明,劉國炳,陳春林,鐘梅,余艷紅.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2017(03)
[3]腫瘤細胞外泌體在腫瘤免疫中的作用[J]. 張曉航,張淑雯,寧永玲,戚春建.  中國免疫學雜志. 2017(02)



本文編號：3301547