目的:探討mi R-5195-3p對(duì)人宮頸癌細(xì)胞系Si Ha增殖、遷移與侵襲的影響。方法:采用qRT-PCR檢測(cè)人宮頸癌細(xì)胞SiHa和正常上皮細(xì)胞HaCaT中mi R-5195-3p的表達(dá)水平。將mi R-5195-3p mimic轉(zhuǎn)染至Si Ha細(xì)胞中構(gòu)建外源性過表達(dá)細(xì)胞株,陰性對(duì)照組中則轉(zhuǎn)染NC mimic,并用q RT-PCR驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率;通過MTT和集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力;劃痕愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞橫向遷移能力; Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞縱向遷移能力和侵襲能力;采用qRT-PCR和Western blot檢測(cè)E-cadherin、Vimentin與snail m RNA轉(zhuǎn)錄水平及蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:宮頸癌細(xì)胞Si Ha中的mi R-5195-3p表達(dá)水平較HaCaT偏低（P <0. 05）。與陰性對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染mi R-5195-3p mimic的SiHa細(xì)胞中mi R-5195-3p水平顯著增高（P <0. 01）;并且其體外增殖（P <0. 001）,遷移（P <0. 001）與侵襲能力（P <0. 001）明顯減弱;同時(shí)E-cad... 

【文章來源】：中國(guó)生物工程雜志. 2020,40(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

mi R-5195-3p在正常上皮細(xì)胞HaCaT與宮頸癌細(xì)胞Si Ha中的表達(dá)

宮頸癌是最常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)病年齡日趨年輕化，嚴(yán)重威脅女性健康與生命。目前，國(guó)內(nèi)外宮頸癌的發(fā)病率和死亡率仍居高不下，而發(fā)展中國(guó)家尤為嚴(yán)重，其原因大多與宮頸癌診斷較晚和遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移有關(guān)[10]。因此，對(duì)宮頸癌發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究顯得尤為重要。宮頸癌發(fā)生發(fā)展的整個(gè)過程幾乎都存在mi RNA的異常表達(dá)，尤其是在宮頸癌的發(fā)病機(jī)制、放化療敏感性以及預(yù)后方面，mi RNA都起著非常重要的作用[11-12]。mi RNA作為重要的基因調(diào)控分子，近年來其與腫瘤的關(guān)系已成為生物學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。許多文獻(xiàn)報(bào)道了mi RNA在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用。Zhao等[13]研究發(fā)現(xiàn)相較于正常組織，mi R-143低表達(dá)于宮頸癌組織，且發(fā)現(xiàn)過表達(dá)mi R-143可明顯抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖并促進(jìn)其凋亡。Zhang等[14]研究發(fā)現(xiàn)mi R-137在宮頸癌中低表達(dá)，通過過表達(dá)mi R-137發(fā)現(xiàn)可明顯抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖和遷移，且進(jìn)一步研究證實(shí)mi R-137通過靶向EZH2抑制宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。Li等[15]在宮頸癌細(xì)胞系中證實(shí)mi RNA-106a表達(dá)顯著上調(diào)，通過過表達(dá)mi RNA-106a可明顯促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的遷移和侵襲，而抑制mi RNA-106a的活性則可顯著抑制癌細(xì)胞的遷移與侵襲。以上研究表明mi RNA在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中扮演抑癌或致癌因子的角色，可能作為生物標(biāo)志物或治療靶點(diǎn)應(yīng)用于臨床治療。

mi R-5195-3p是近年新發(fā)現(xiàn)的一個(gè)mi RNA，目前關(guān)于mi R-5195-3p的研究報(bào)道較少，主要集中在腫瘤方面。研究報(bào)道，mi R-5195-3p在卵巢癌中扮演一個(gè)抑癌因子的角色，其在癌組織中呈現(xiàn)出低表達(dá)的情況，且隨著病理分級(jí)的增大，其表達(dá)越發(fā)降低，與原位癌組織相比，轉(zhuǎn)移癌組織中的mi R-5195-3p也是明顯降低的[7]。在三陰性乳腺癌中，mi R-5195-3p低表達(dá)于紫杉醇耐藥的乳腺癌組織和細(xì)胞系，其可能的機(jī)制則是通過靶向下調(diào)EIF4A2增強(qiáng)三陰性乳腺癌對(duì)紫杉醇的化療敏感性[8]。在結(jié)腸癌中，mi R-5195-3p則通過負(fù)性調(diào)控TGF-β/SMAD信號(hào)通路發(fā)揮其抑制腫瘤的作用[9]。研究表明mi R-5195-3p在膀胱癌組織中低表達(dá)，其通過直接靶向致癌基因KLF5抑制膀胱癌細(xì)胞的增殖和侵襲[16]。在非小細(xì)胞肺癌中，mi R-5195-3p通過抑制MYO6的表達(dá)進(jìn)而發(fā)揮其抑制腫瘤細(xì)胞增殖，遷移和侵襲的作用[17]。文獻(xiàn)報(bào)道在膠質(zhì)瘤中，mi R-5195-3p通過靶向Beclin1抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡和自噬[18]。宮頸癌是女性惡性腫瘤發(fā)病率僅次于乳腺癌的腫瘤，且其在女性生殖器官惡性腫瘤中發(fā)病率高于卵巢癌位居第一，mi R-5195-3p在上述癌癥中多與轉(zhuǎn)移侵襲相關(guān)，而宮頸癌治療失敗的主要原因則是轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)，目前mi R-5195-3p與宮頸癌的關(guān)系尚屬未知，因此研究mi R-5195-3p在宮頸癌中發(fā)揮的作用及其分子機(jī)制，或許會(huì)為宮頸癌的治療帶來新的理論基礎(chǔ)。圖4 mi R-5195-3p促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞Si Ha的侵襲


本文編號(hào)：3274011