卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌而居第三位,但卵巢癌病死率居各類婦科惡性腫瘤的首位。5年生存率不足30%,嚴(yán)重威脅女性健康和生命。卵巢癌早期癥狀隱匿,常在癥狀出現(xiàn)之前已經(jīng)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移,大多數(shù)患者就診時(shí)已處于晚期。卵巢癌的臨床治療以手術(shù)為主,化療為輔,并配合放療、生物學(xué)治療等手段。近年來,隨著醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)理論和技術(shù)的發(fā)展,卵巢癌的基因治療成為大家關(guān)注的焦點(diǎn),并在臨床上取得了較好的療效,具有較好的應(yīng)用前景。CUL4B（Cullin 4B）作為支架蛋白參與構(gòu)成E3泛素連接酶復(fù)合物Cullin4B—Ring E3 Ligase（CRL4B）,參與調(diào)節(jié)包括細(xì)胞周期、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因轉(zhuǎn)錄和生物體個(gè)體生長發(fā)育等多項(xiàng)重要生命活動(dòng)。CRL4B不僅可以通過泛素化降解p53和cydin E參與調(diào)控細(xì)胞增殖和衰老過程,還能通過單泛素化H2A蛋白,調(diào)節(jié)靶基因啟動(dòng)子組蛋8113的乙�；约凹谆冗^程,從而在表觀遺傳水平上調(diào)控p16、p21、PTGDS、miRNA一371/372等基因的表達(dá)。越來越多的證據(jù)顯示CRL4B在腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。CRL4B可以通過單泛素化... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 組織標(biāo)本及細(xì)胞系
        1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器及實(shí)驗(yàn)設(shè)備
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 組織芯片的制備
        1.2.2 蛋白質(zhì)印跡法(western blot)
        1.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
            1.2.3.1 細(xì)胞復(fù)蘇及培養(yǎng)
            1.2.3.2 貼壁細(xì)胞傳代
            1.2.3.3 細(xì)胞凍存
        1.2.4 si-RNA-CUL4B轉(zhuǎn)染細(xì)胞
        1.2.5 cck-8 實(shí)驗(yàn)檢測CUL4B對細(xì)胞增殖活性的影響
        1.2.6 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測CUL4B對細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響
        1.2.7 提取總蛋白
        1.2.8 蛋白質(zhì)印跡法(western blot)檢測CUL4B對細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響
2 結(jié)果
    2.1 免疫組織化學(xué)檢測提示組織標(biāo)本中CUL4BmRNA和蛋白表達(dá)差異
    2.2 si-RNA-CUL4B對 CUL4B的有效抑制作用
    2.3 CUL4B敲低抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖活性
    2.4 CUL4B敲低抑制卵巢癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力
    2.5 CUL4B敲低抑制卵巢癌細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CUL4B作用機(jī)制及其與腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 張健,吳愛國.  廣東醫(yī)學(xué). 2016(10)
[2]E3泛素連接酶CUL4A在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及機(jī)制[J]. 徐洋洋,張猛,王允山.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2013(02)
[3]Wnt信號通路:調(diào)控機(jī)理和生物學(xué)意義[J]. 尹定子,宋海云.  中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2011(02)

博士論文
[1]CUL4B通過調(diào)控miRNAs促進(jìn)肺癌細(xì)胞增殖和遷移[D]. 弭軍.山東大學(xué) 2016
[2]CUL4B調(diào)控c-Met通路在腎細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展及靶向藥物耐藥中的作用及機(jī)制研究[D]. 陳守臻.山東大學(xué) 2016



本文編號：3265483