目的探討敲低YTH結構域N⁶甲基腺嘌呤（m⁶A）RNA結合蛋白2（YTHDF2）對人宮頸癌細胞增殖、周期和凋亡的影響。方法利用人蛋白圖譜（Human Protein Atlas）數據庫分析YTHDF2在宮頸癌中表達及與生存時間的關系。收集宮頸癌和正常宮頸組織各31例,采用免疫組織化學法檢測YTHDF2的蛋白表達差異;利用敲低YTHDF2的短發(fā)夾RNA（shRNA）及空載質粒包裝慢病毒,并感染至宮頸癌HeLa細胞和SiHa細胞,實時熒光定量PCR及Western blot法檢測YTHDF2的mRNA及蛋白水平,敲低YTHDF2后,采用CCK-8法檢測細胞增殖活性,集落形成實驗檢測細胞集落形成能力;流式細胞術檢測細胞周期和細胞凋亡情況。結果檢測數據庫發(fā)現YTHDF2在宮頸癌中表達越高生存時間越短,與正常宮頸組織相比, YTHDF2在宮頸癌組織高表達。敲低YTHDF2后,抑制宮頸癌細胞增殖,促進細胞凋亡,使細胞阻滯于S期。結論 YTHDF2在宮頸癌組織中高表達,敲低后抑制宮頸癌細胞增殖并促進其凋亡。 

【文章來源】：細胞與分子免疫學雜志. 2020,36(03)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

YTHDF2敲低后對宮頸癌細胞增殖和集落形成的影響

分別處理各組細胞, 檢測細胞凋亡比例, 結果顯示, HeLa細胞對照組、 HeLa細胞YTHDF2-sh1、 HeLa細胞YTHDF2-sh2、 SiHa細胞對照組、 SiHa細胞YTHDF2-sh1、 SiHa細胞YTHDF2-sh2凋亡細胞比例分別為(3.52±0.49)%、 (17.06±1.74)%、 (15.03±0.3)%、 (3.72±0.35)%、 (13.13±1.56)%、 (13.09±1.57)%。與對照組細胞相比, 敲低YTHDF2的表達后的宮頸癌細胞凋亡率顯著增加, 差異具有統計學意義(P<0.05或P<0.01, 圖6)。 說明宮頸癌細胞YTHDF2敲低后能夠促進細胞凋亡。3 討論

利用HPA數據庫分析發(fā)現YTHDF2高表達患者生存期的95%置信區(qū)間(cofidence interval, CI)為7.63 ～10.87 年, YTHDF2低表達患者生存期的95% CI為10.01 ～15.69 年, 高表達的宮頸癌患者總生存時間比YTHDF2低表達的宮頸癌患者短(P<0.05, 圖1), 說明YTHDF2的高表達會縮短宮頸癌患者的生存期。2.2 YTHDF2在宮頸癌組織高表達

【參考文獻】：
期刊論文
[1]敲低MGC-803胃癌細胞YTHDF2抑制其增殖并促進其凋亡[J]. 張杰,皮靜楠,劉越,余佳,馮濤.  細胞與分子免疫學雜志. 2017(12)



本文編號：3236820