第一部分:非編碼RNA在雙酚A致小鼠精母細胞凋亡中的表達譜改變【目的】分析非編碼RNA在雙酚A致小鼠精母細胞凋亡中表達譜的改變,分析其參與的重要通路和相關分子,尋找進一步研究的靶標�！痉椒ā坎捎貌煌瑵舛鹊腂PA對小鼠精母細胞系GC-2細胞進行染毒,對照組為0.1%DMSO溶劑組處理的GC-2細胞,采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）試劑盒檢測細胞活性,探索BPA處理對GC-2細胞在半抑制濃度IC50。選擇接近于IC50的120μM濃度對細胞進行染毒,檢測細胞DNA復制能力和凋亡率。對BPA 120μM處理48 h后以及對照組的細胞進行收集,提取RNA。將樣品分為三份,分別進行circular RNA（circ RNA）,micro RNA（mi RNA）和m RNA測序,測序深度為10G。circ RNA、mi RNA和m RNA測序深度分別為10G、10M和6G。差異表達的circ RNA母基因的和m RNA的GO和KEGG分析采用R語言的Bioconductor包進行分析,并用ggplot包進行圖形可視化輸出。差異mi RNA參與生物學功能和信號通路分析是基于其... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：221 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

CCK-8實驗檢測不同劑量BPA處理下細胞活性

圖 2. Edu 摻入檢測細胞 DNA 復制活性。a.0 μM 和 120 μM 的 BPA 處理 GC-2 細胞 48 h 后Edu 增殖實驗；b.定量展示 a 圖 Edu 摻入百分比。實驗重復次數(shù) 3 次，數(shù)據(jù)以均值±標準誤展示（***P < 0.0001）。3.1.3 流式細胞學檢測 BPA 染毒后細胞凋亡情況。采用流式細胞學儀以Annexin V-APC/7-AAD試劑盒檢測為暴露組和120 μM BPA暴露組細胞的凋亡率，處理組細胞凋亡率（早期凋亡率 LR% + 晚期凋亡率 UR%）約為 17%左右，較未處理組細胞凋亡率（7.5%左右）明顯升高（圖 3）（***P < 0.001）。

圖 2. Edu 摻入檢測細胞 DNA 復制活性。a.0 μM 和 120 μM 的 BPA 處理 GC-2 細胞 48 h 后Edu 增殖實驗；b.定量展示 a 圖 Edu 摻入百分比。實驗重復次數(shù) 3 次，數(shù)據(jù)以均值±標準誤展示（***P < 0.0001）。3.1.3 流式細胞學檢測 BPA 染毒后細胞凋亡情況。采用流式細胞學儀以Annexin V-APC/7-AAD試劑盒檢測為暴露組和120 μM BPA暴露組細胞的凋亡率，處理組細胞凋亡率（早期凋亡率 LR% + 晚期凋亡率 UR%）約為 17%左右，較未處理組細胞凋亡率（7.5%左右）明顯升高（圖 3）（***P < 0.001）。


本文編號：3226702