本文關(guān)鍵詞：二甲雙胍對人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖作用的干預(yù)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過觀察二甲雙胍(Metformin)對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞株中REDD1蛋白表達(dá)的影響,及可能存在的REDD1/mTOR信號通路(獨(dú)立于AMPK信號通路)在其中的作用,探討REDD1對人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖影響。方法:取人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa細(xì)胞株復(fù)蘇,于含5%CO2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液為含有10%FBS的RPMI 1640培養(yǎng)液,細(xì)胞達(dá)匯片后按5×105細(xì)胞/瓶接種于25 cm2培養(yǎng)瓶,每2天換一次細(xì)胞培養(yǎng)液。Ishikawa細(xì)胞體積達(dá)到90%左右時(shí),改用不含血清的RPMI 1640培養(yǎng)液培養(yǎng)12h,再進(jìn)行以下藥物干預(yù):二甲雙胍1 mmol/l、5 mmol/l、10 mmol/l干預(yù)48小時(shí),以等體積無血清的RPMI 1640培養(yǎng)液為對照組。干預(yù)后取各干預(yù)組細(xì)胞,MTT法測各組細(xì)胞增殖率,提取各組RNA及總蛋白,分別用RT-PCR及Western-blot檢測各組REDD1、mTOR蛋白及基因的表達(dá)水平。結(jié)果:1、二甲雙胍抑制人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞增殖,隨著二甲雙胍濃度的增加,細(xì)胞增殖的抑制率也隨之增加,在10 mmol/L濃度時(shí)二甲雙胍對細(xì)胞增殖的抑制作用最強(qiáng)(P0.05)。2、二甲雙胍能上調(diào)REDD1的表達(dá)及抑制mTOR的表達(dá)。1 mmol/l、5 mmol/l、10 mmol/l REDD1 mRNA的表達(dá)是對照組的1.09倍、1.15倍、1.29倍(P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。mTOR mRNA的表達(dá)是對照組的0.90倍、0.38倍、0.24倍(P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、二甲雙胍能增加REDD1/mTOR信號通路中REDD1蛋白的表達(dá),并抑制其下游mTOR蛋白的表達(dá),REDD1蛋白的表達(dá)分別是對照組的4.29倍、4.45倍、8.66倍,mTOR蛋白的表達(dá)分別是對照組的0.70倍、0.51倍、0.20倍,均在10 mmol/l的濃度作用最顯著,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:二甲雙胍能明顯上調(diào)REDD1的表達(dá),REDD1/m TOR信號通路可能是調(diào)節(jié)Ishikawa細(xì)胞株增殖的關(guān)鍵信號通路之一。二甲雙胍通過增加REDD1/mTOR信號通路中REDD1的表達(dá)及抑制mTOR的表達(dá)來發(fā)揮其對Ishikawa細(xì)胞株的抑制作用。提示REDD1可能在治療人子宮內(nèi)膜癌過程中發(fā)揮重要作用,且REDD1/mTOR信號通路參與了這一過程。
【關(guān)鍵詞】：二甲雙胍 人子宮內(nèi)膜癌 細(xì)胞增殖 REDD1/mTOR信號通路
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 英文縮寫及全文和中文對照表9-10
• 第1章 引言10-14
• 第2章 材料與方法14-26
• 2.1 主要材料及試劑14-16
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞14
• 2.1.2 主要試劑、產(chǎn)地14-15
• 2.1.3 主要儀器設(shè)備和產(chǎn)地15-16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-26
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)用品及液體的配制16-18
• 2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)方法18-19
• 2.2.3 分組及藥物干預(yù)19
• 2.2.4 MTT試劑檢測細(xì)胞增殖19-20
• 2.2.5 RT-PCR檢測m RNA表達(dá)20-23
• 2.2.6 Western blot檢測蛋白表達(dá)23-25
• 2.2.7 數(shù)據(jù)處理25-26
• 第3章 結(jié)果26-29
• 3.1 二甲雙胍對人子宮內(nèi)膜癌ISHIKAWA細(xì)胞增殖的影響：26
• 3.2 二甲雙胍對人子宮內(nèi)膜癌ISHIKAWA細(xì)胞REDD1/MTOR信號通路的影響26-29
• 3.2.1 二甲雙胍對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞REDD1/m TOR信號通路中相關(guān)蛋白表達(dá)的影響26-28
• 3.2.2 二甲雙胍對人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞REDD1/m TOR信號通路中相關(guān)基因表達(dá)的影響28-29
• 第4章 討論29-33
• 第5章 結(jié)論與展望33-34
• 5.1 結(jié)論33
• 5.2 展望33-34
• 致謝34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 綜述39-50
• 參考文獻(xiàn)45-50

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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  本文關(guān)鍵詞：二甲雙胍對人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖作用的干預(yù)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：321850