發(fā)布時間：2021-06-07 03:15

　　目的:探索子宮內(nèi)膜腺癌來源間充質(zhì)干細胞（Endometrial adenocarcinoma derived mesenchymal stem cell,ECMSC）對子宮內(nèi)膜癌發(fā)展的影響與作用機制。內(nèi)容:1.正常子宮內(nèi)膜組織與癌變組織來源MSC的分離培養(yǎng)與鑒定。2.體外實驗檢測癌組織與正常組織來源MSC對子宮內(nèi)膜癌細胞系HEC-1A的作用與機制。3.體內(nèi)裸鼠實驗檢測癌組織與正常組織來源MSC對子宮內(nèi)膜癌發(fā)展的影響。方法:1.采用組織消化法分離培養(yǎng)人子宮內(nèi)膜來源MSC（Endometrium derived mesenchymal stem cell,EMSC）和子宮內(nèi)膜腺癌來源MSC,倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),流式細胞術(shù)檢測培養(yǎng)細胞的細胞表型,采用油紅O染色、堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）染色檢測細胞的成脂和成骨誘導分化能力,熒光定量PCR（quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）檢測成脂分化過程中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子PPARγ和成骨分化的標志性酶ALP的表達。2.為探討ECMSC和EM... 

【文章來源】：軍事科學院北京市

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1分離培養(yǎng)貼壁細胞的形態(tài)觀察A:EMSCB:ECMSC

第 7 頁圖 1.2 流式細胞術(shù)檢測兩種細胞的細胞表型A: EMSC B: ECMSC1.5.2 ECMSC 和 EMSC 成脂分化能力檢測ECMSC 和 EMSC 進行成脂誘導分化，在誘導培養(yǎng)基培養(yǎng) 14d 后，油紅 O 染色，倒置顯微鏡下可見，誘導組細胞內(nèi)聚集成團分布的大量空泡樣紅色脂滴，呈花環(huán)狀或串珠狀，脂滴數(shù)量多，相對較大而圓，且 EMSC 和 ECMSC 成脂誘導組的細胞內(nèi)形成的脂滴均多于自分組(圖 1.3，1.4) 。RT-PCR 檢測自分化組和成脂誘導組細胞表達成脂分化關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子 PPAR-γ的表達，結(jié)果顯示，誘導組細胞的PPAR-γ表達顯著高于對照組（圖 1.5，P<0.0001, P<0.005）。

圖 1.3 油紅 O 染色檢測 EMSC 的成脂誘導分化A:自分化組 B：誘導分化組圖 1.4 油紅 O 染色檢測 ECMSC 的成脂誘導分化A: 自分化組 B：誘導分化組


本文編號：3215735