發(fā)布時(shí)間：2021-05-19 01:43

　　目的:體外培養(yǎng)人卵巢癌細(xì)胞SKOV3,誘導(dǎo)篩選出順鉑耐藥細(xì)胞SKOV3/DDP。研究稀土氯化鑭對(duì)人卵巢癌DDP耐藥細(xì)胞是否有逆轉(zhuǎn)作用,并初步探討其相關(guān)機(jī)制。方法:1、以低濃度DDP逐漸遞增,誘導(dǎo)卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞SKOV3/DDP,倒置顯微鏡下觀察兩株細(xì)胞形態(tài)學(xué)的差別,用CCK8法測(cè)定DDP（1、2、4、6、8、16、32μg/ml）對(duì)SKOV3細(xì)胞及SKOV3/DDP細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率,分別得出IC50,計(jì)算得到耐藥細(xì)胞的耐藥指數(shù)。2、CCK8法檢測(cè)以一定濃度梯度氯化鑭作用36、48h后對(duì)SKOV3/DDP細(xì)胞的增殖活力影響,并選取生長(zhǎng)抑制率小于5%濃度為相對(duì)無細(xì)胞毒性氯化鑭濃度;CCK8法檢測(cè)無細(xì)胞毒性濃度的氯化鑭與DDP（1、2、4、6、8、16、32μg/ml）聯(lián)用對(duì)SKOV3/DDP細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率,比較聯(lián)合用藥與單用DDP作用的IC50。3、實(shí)驗(yàn)設(shè)四組:空白對(duì)照組、單獨(dú)氯化鑭10μg/ml組、單獨(dú)DDP5μg/ml組、氯化鑭10μg/ml+DDP5μg/ml組。用克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同實(shí)驗(yàn)組SKOV3/DDP細(xì)胞的克隆形成能力,以流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同實(shí)驗(yàn)組SKOV3/DDP細(xì)胞凋... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞株來源
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 主要工作液
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 SKOV3人卵巢癌細(xì)胞的培養(yǎng)及SKOV3/DDP耐藥株的誘導(dǎo)
        2.2.2 CCK8細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        2.2.3 克隆形成實(shí)驗(yàn)
        2.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        2.2.5 Western blot檢測(cè)Caspase-3、ERCC1的表達(dá)
        2.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 結(jié)果
    3.1 SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)
    3.2 CCK8法對(duì)藥物細(xì)胞毒性檢測(cè)
        3.2.1 SKOV3/DDP耐藥指數(shù)
        3.2.2 不同濃度氯化鑭對(duì)SKOV3/DDP細(xì)胞的作用
        3.2.3 無細(xì)胞毒性濃度氯化鑭對(duì)SKOV3/DDP耐DDP的逆轉(zhuǎn)作用
    3.3 細(xì)胞克隆形成率
    3.4 流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡
    3.5western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)的改變
第4章 討論
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3194869