發(fā)布時間：2021-05-17 23:26

　　目的:探究P53突變體R175H對HELA細胞增殖、凋亡的影響及其機制分析方法:1.Western Blot法檢測HPV E6對P53野生型及突變體（R273H、R175H）的作用。2.以野生型P53與R175H質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染進HELA細胞的組別為實驗組,余單獨轉(zhuǎn)染VR、野生型P53、P53 R175H質(zhì)粒入HELA細胞為對照組,細胞計數(shù)法、MTS法檢測HELA細胞的活力、增殖能力,流式細胞術(shù)檢測HELA細胞的凋亡率。3.Western Blot法檢測在不同細胞系中（HEK293T和HELA細胞）,P53R175H對HPV E6降解野生型P53的影響。4.免疫共沉淀法檢測在H1299細胞系（無P53基因）中,R175H對HPV E6/E6AP異二聚體的影響。結(jié)果:1.P53 R175H不能被HPV E6降解,同時HPV E6表達量增加。2.P53 R175H抑制HELA細胞的活力及增殖能力,并誘導其凋亡3.P53 R175H抑制HPV E6降解野生型P53,同時HPV E6表達量增加4.P53 R175H有效阻斷HPV E6/E6AP結(jié)合從而抑制HPV E6降解P53結(jié)論:P53 R17... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
英文縮略詞
第1章 引言
第2章 綜述
    2.1 高危型HPV E6蛋白的主要生物學特性
        2.1.1 鋅指結(jié)構(gòu)
        2.1.2 PDZ結(jié)合域
        2.1.3 HPV E6的晶體結(jié)構(gòu)
    2.2 高危型HPV E6在宮頸癌中的作用及機制
        2.2.1 高危型HPV E6蛋白與P53相互作用介導細胞凋亡
        2.2.2 高危型HPV E6蛋白激活端粒酶活性致細胞永生化
        2.2.3 高危型HPV E6促使細胞凋亡信號衰減
    2.3 高危型HPV E6作為抗癌治療的新靶點
    2.4 結(jié)語
第3章 材料與方法
    3.1 實驗材料
        3.1.1 細胞株、病毒及耗材
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 質(zhì)粒
        3.1.4 主要儀器
        3.1.5 主要試劑配制
    3.2 實驗方法
    3.3 統(tǒng)計學分析
第4章 結(jié)果
    4.1 P53 R175H不能被HPV E6降解，同時HPV E6表達量增加
    4.2 P53 R175H抑制HELA細胞的活力及增殖能力，并誘導其凋亡
    4.3 P53 R175H抑制HPV E6降解野生型P53，同時HPV E6表達量增加
    4.4 P53 R175H有效阻斷HPV E6與E6AP結(jié)合，抑制HPV E6降解P53
第5章 討論
    5.1 P53 R175H在HPV E6降解P53信號通路的作用機制
    5.2 P53 R175H對HELA細胞的影響
    5.3 P53 R175H在HPV E6/E6AP/P53異三聚體中作用機制
第6章 結(jié)論
參考文獻
作者簡介及在讀期間取得的科研成果
致謝



本文編號：3192657