HPV16/18型E6蛋白熒光免疫層析聯(lián)合檢測方法的建立
發(fā)布時間:2021-05-15 17:14
背景宮頸癌是發(fā)病率僅次于乳腺癌的女性常見惡性腫瘤。高危型人乳頭瘤病毒(HPV)的持續(xù)性感染是宮頸癌及癌前病變發(fā)生的首要原因,其中80%以上宮頸癌的發(fā)生與高危型HPV16和18有關。當患者持續(xù)性感染高危型HPV16/18時,E6蛋白在宮頸上皮細胞內大量合成,并通過抑制抑癌因子P53活性、激活端粒酶等途徑引起宮頸上皮細胞發(fā)生惡性轉化,最終導致宮頸癌前病變及宮頸癌。因此,通過檢測宮頸上皮脫落細胞內HPV16/18型E6蛋白含量可為患者宮頸癌及癌前病變的早期篩查及輔助診斷提供依據(jù)。但由于以宮頸上皮脫落細胞為檢測樣本,受到取樣誤差的影響大,臨床上缺乏對其進行快速定量檢測的方法。目的建立以管家蛋白β-Actin為內參的人宮頸上皮細胞中HPV16/18型E6蛋白熒光免疫層析聯(lián)合定量快速檢測方法,為患者宮頸癌及癌前病變的早期篩查及輔助診斷提供一種靈敏度高,特異性好,操作簡便成本低廉的檢測手段。方法1.HPV18 E6蛋白重組表達及純化:將p ET28a-HPV18E6質粒轉入BL21(DE3)菌中,采用單因素變量法,對誘導劑濃度、誘導時間及誘導溫度進行優(yōu)化并表達目的蛋白,利用Ni親和層析法純化。2.參...
【文章來源】:鄭州大學河南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
前言
1 材料與方法
2 結果與分析
3 討論
4 結論
參考文獻
綜述
參考文獻
個人簡歷
致謝
本文編號:3188030
【文章來源】:鄭州大學河南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學位級別】:碩士
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中英文縮略詞表
前言
1 材料與方法
2 結果與分析
3 討論
4 結論
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