發(fā)布時間：2021-05-13 22:21

　　背景與目的:NK4不僅具有HGF拮抗劑作用,而且具有抗血管生成作用。本實驗在人卵巢癌細胞SKOV-3中轉(zhuǎn)染NK4cDNA片段,研究NK4在裸鼠體內(nèi)通過NK細胞抑制人卵巢癌的發(fā)展。方法:NK4和熒光霉素（Luciferase）表達的質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染人卵巢癌細胞SKOV-3,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后,得到實驗組SKOV-3/NK4細胞和對照組（SKOV-3/LUC）細胞,再加上之前沒有做任何處理的SKOV-3細胞作為空白對照。將上述三種細胞在培養(yǎng)基中培養(yǎng),進行如下檢測:1.分別檢測三組細胞培養(yǎng)基中NK4蛋白的表達情況2.將SKOV-3細胞,分別在上述三種細胞（SKOV-3/NK4,SKOV-3/LUC和SKOV-3）的培養(yǎng)基當中培養(yǎng)后,分別檢測三組細胞裂解液當中c-Met以及其活化產(chǎn)物p-c-Met的表達情況。3.用三組腫瘤細胞（SKOV-3/NK4、SKOV-3/LUC和SKOV-3）分別注射于裸鼠皮下,建立皮下種植瘤模型,比較三組腫瘤細胞的生長速度。4.將皮下腫瘤結(jié)節(jié)切除離體,用石蠟包埋、切片、免疫組化、CD49b標記,在顯微鏡下觀察腫瘤組織當中NK細胞的聚集情況并計數(shù)統(tǒng)計。結(jié)果:在SKOV-3/NK4... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：34 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 細胞培養(yǎng)
    2.2 NK4c DNA轉(zhuǎn)染
    2.3 三組細胞培養(yǎng)基中NK4 蛋白表達情況(western blot)
    2.4 c-Met及其活化產(chǎn)物p-c-Met的測定(western blot)
    2.5 實驗動物模型建立
    2.6 種植瘤體積計算
    2.7 種植瘤組織中NK細胞的數(shù)量
    2.8 實驗結(jié)果用Student′st檢驗統(tǒng)計
3 結(jié)果
    3.1 三組細胞培養(yǎng)基中NK4蛋白表達情況
    3.2 NK4 通過競爭性拮抗HGF以抑制c-Met活化
    3.3 裸鼠種植瘤生長曲線
    3.4 種植瘤組織中NK細胞的數(shù)量
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述 卵巢癌的基因治療之研究進展
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]腫瘤免疫逃逸機制研究進展[J]. 程吉華,趙德強.  衛(wèi)生研究. 2018(02)
[2]Gene therapy in pancreatic cancer[J]. Si-Xue Liu,Zhong-Sheng Xia,Ying-Qiang Zhong.  World Journal of Gastroenterology. 2014(37)
[3]NK4基因轉(zhuǎn)染對人卵巢癌細胞SKOV-3生物學特性的影響[J]. 王冬冬,霍乃晨,耿東華,楊志亮,蔡峰,尹少尉,張淑蘭.  中國微生態(tài)學雜志. 2013(02)
[4]卵巢癌的治療現(xiàn)狀回顧[J]. 周璟,黃學惠.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2012(06)
[5]卵巢癌基因治療研究與進展[J]. 席勇,鄧燕杰.  國外醫(yī)學(婦產(chǎn)科學分冊). 2007(03)



本文編號：3184806