【目的】探討mTOR/RPS6信號通路在多囊卵巢綜合征（PCOS）卵巢中的作用及機制�！痉椒ā看菩許D大鼠40只,隨機分為正常對照組、生理鹽水對照組和來曲唑實驗組。來曲唑實驗組用來曲唑灌胃三周建立PCOS大鼠模型。定期監(jiān)測三組大鼠體重和動情周期。三周后檢測大鼠血清中雌二醇（E₂）、睪酮（T）、胰島素（I）等的含量,記錄卵巢重量,觀察卵巢組織形態(tài)學變化,以確認PCOS建模成功。應用免疫組化和Western blot檢測大鼠卵巢中mTOR、RPS6的表達及磷酸化水平以及PCNA蛋白在卵巢內的表達情況,TUNEL法檢測卵泡細胞的凋亡情況。免疫細胞化學檢測體外培養(yǎng)人卵巢顆粒細胞（KGN）中mTOR、RPS6的表達及其磷酸化水平,分別觀察mTOR的抑制劑-雷帕霉素和激動劑-MHY1485對KGN凋亡的影響�！窘Y果】來曲唑實驗組大鼠動情周期紊亂,體重增加明顯,血清激素水平紊亂,卵巢質量增加且呈多囊樣改變,提示PCOS模型構建成功;來曲唑實驗組大鼠卵巢中mTOR的表達及磷酸化水平明顯上升,而RPS6的磷酸化顯著下降（P<0.05）;此外,來曲唑實驗組大鼠卵巢顆粒細胞凋亡增... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
主要英文縮略語
第1章 緒論
第2章 實驗材料
    2.1 實驗動物
    2.2 實驗用細胞株
    2.3 主要器械和藥品
    2.4 主要實驗儀器
    2.5 試劑
第3章 實驗方法
    3.1 試劑配制方法
    3.2 動物分組和造模方法
    3.3 大鼠動情周期以及體重監(jiān)測
    3.4 瑞氏染色
    3.5 人卵巢顆粒細胞(KGN)培養(yǎng)
    3.6 卵巢石蠟切片的制作和HE染色
    3.7 免疫組織化學染色
    3.8 Westernblot免疫印跡
    3.9 細胞爬片及免疫細胞化學
    3.10 TUNEL凋亡檢測
    3.11 圖像分析及統(tǒng)計學方法
第4章 實驗結果
    4.1 大鼠動情周期改變
    4.2 大鼠體重、卵巢體積和體質量指數(shù)的改變
    4.3 大鼠血清激素水平和血糖血脂含量的檢測
    4.4 卵巢形態(tài)學改變
    4.5 mTOR信號通路相關蛋白在大鼠卵巢組織中的表達
    4.6 大鼠卵巢顆粒細胞凋亡檢測
    4.7 大鼠卵巢膜細胞和間質細胞增殖結果
    4.8 人卵巢顆粒細胞相關蛋白的檢測
第5章 討論
第6章 結論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學位期間的科研成果
課題資助
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]下丘腦-垂體-腎上腺軸和下丘腦-垂體-卵巢軸在多囊卵巢綜合征神經內分泌功能紊亂中的作用[J]. 王凡,張正紅,肖開轉,王正朝.  中國醫(yī)學科學院學報. 2017(05)
[2]短期使用雷帕霉素聯(lián)合調節(jié)性T細胞可延長小鼠移植心臟時間但不能抑制受體腫瘤發(fā)生[J]. 閆挺,駱晨,楊先模,季磊,羅詩樵.  細胞與分子免疫學雜志. 2017(02)
[3]來曲唑和脫氫表雄酮建立腎虛痰濕特征信息肥胖PCOS大鼠動物模型的對比研究[J]. 徐曉娟,黃映紅,姚莉娟,鄧琳雯,李宛靜,王秋香,何蘊良.  中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志. 2015(05)

博士論文
[1]基于PI3K/AKT信號通路研究新加歸腎丸調節(jié)大鼠卵巢顆粒細胞增殖、凋亡的分子機制[D]. 龍旭.成都中醫(yī)藥大學 2015



本文編號：3181468