研究背景:子宮內膜癌（endometrial carcinoma,EC）是發(fā)生于子宮內膜的上皮性惡性腫瘤,是世界各地婦女癌癥致死的重要原因,為女性生殖道三大惡性腫瘤之一,占女性生殖道惡性腫瘤的20%-30%。近期研究顯示,子宮內膜癌的發(fā)病率不斷上升,且有明顯的年輕化趨勢。盡管目前對子宮內膜癌經(jīng)過規(guī)范化治療后,5年生存率有所提升,但對晚期、低分化子宮內膜癌或復發(fā)型子宮內膜癌的治療效果仍不顯著。因此,探究子宮內膜癌的發(fā)生和進展的細胞及分子機制,新的診斷和預后標記物以及子宮內膜癌新的治療策略對于改善子宮內膜癌患者的臨床診斷及預后具有迫切而現(xiàn)實的意義。目前大量研究表明,子宮內膜癌與肥胖、糖尿病、高血壓或者是長期暴露于無抵抗的雌激素等因素有關,但是子宮內膜癌發(fā)生和發(fā)展的具體機制仍不明確,基因調控異常如基因表觀遺傳等不足以完全解釋子宮內膜癌的發(fā)生發(fā)展。因此,尋找新的可替代的靶向策略,對于子宮內膜癌的診斷、病人的治療及預后的預測是迫在眉睫的。近年來研究發(fā)現(xiàn),micro RNA（miRNA）在包括子宮內膜癌等多種癌癥的分子生物進程中起到至關重要的作用。成熟微小RNA（micro RNA,簡寫為miRN... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學位級別】：博士

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摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
    1.1 子宮內膜癌的研究進展
        1.1.1 子宮內膜癌的疾病發(fā)展現(xiàn)狀
        1.1.2 子宮內膜癌的流行病學
        1.1.3 子宮內膜癌的治療方式
    1.2 MIR-29B概述
        1.2.1 miRNA與腫瘤發(fā)生的研究進展
        1.2.2 miR-29b與腫瘤發(fā)生的研究進展
    1.3 VEGFA與子宮內膜癌的研究進展
    1.4 本課題的研究思路及意義
第2章 子宮內膜癌組織中MIR-29B的表達及其與臨床病理特征和MVD的關系
    2.1 背景
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器
        2.2.4 主要試劑及配置
        2.2.5 細胞復蘇
        2.2.6 細胞傳代
        2.2.7 細胞凍存
        2.2.8 組織和細胞系總RNA的提取
        2.2.9 實時熒光定量PCR（Quantitative Reverse Transcription PCR，q RT-PCR）
        2.2.10 免疫組化
        2.2.11 統(tǒng)計學方法
    2.3 結果
        2.3.1 臨床相關資料
        2.3.2 qRT-PCR檢測子宮內膜癌組織及細胞中miR-29b的水平
        2.3.3 子宮內膜癌組織中miR-29b的表達與患者臨床病理特征的關系
        2.3.4 子宮內膜癌組織miR-29b的表達與微血管密度（MVD）的相關性
    2.4 討論
    2.5 結論
第3章 MIR-29B調控子宮內膜癌血管新生的作用和機制
    3.1 背景
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要儀器
        3.2.4 主要試劑及配置
        3.2.5 細胞培養(yǎng)
        3.2.6 質粒及寡核苷酸構建
        3.2.7 慢病毒感染目的細胞實驗
        3.2.8 組織和細胞系總RNA的提取
        3.2.9 實時熒光定量PCR（qRT-PCR）
        3.2.10 靶基因預測和驗證實驗
        3.2.11 載體構建
        3.2.12 lipo3000脂質體瞬時轉染
        3.2.13 雙熒光報告
        3.2.14 Western blot檢測蛋白表達
        3.2.15 裸鼠成瘤實驗及分組
        3.2.16 裸鼠接種腫瘤后生長狀況的觀察
        3.2.17 免疫組化
        3.2.18 統(tǒng)計學方法
    3.3 結果
        3.3.1 生物信息學軟件預測miR-29b的靶基因
        3.3.2 miR-29b調節(jié)VEGFA的表達
        3.3.3 雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)驗證mi R-29b的靶基因
        3.3.4 子宮內膜癌組織中VEGFA的表達及其與臨床病理特征的關系
        3.3.5 細胞中miR-29b與VEGFA、ERK、Akt、mTOR、Bcl-2 的mRNA水平
        3.3.6 細胞中miR-29b與VEGFA、ERK、Akt、mTOR、Bcl-2 的蛋白水平
        3.3.7 成功建立裸鼠子宮內膜癌移植瘤模型
        3.3.8 miR-29b對裸鼠移植腫瘤生長的影響
        3.3.9 miR-29b對裸鼠移植腫瘤血管新生的影響
    3.4 討論
    3.5 結論
第4章 全文小結
第5章 結論與展望
    5.1 結論
    5.2 展望
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3159957