目的:本論文通過(guò)探討抗腫瘤藥物二甲雙胍（Metformin）抑制卵巢癌HO8910和SKOV3細(xì)胞增殖和遷移的分子機(jī)理,鑒定出二甲雙胍攻擊卵巢癌的靶向途徑和分子靶點(diǎn),為二甲雙胍在卵巢癌治療中的臨床應(yīng)用以及卵巢癌的靶向治療奠定理論基礎(chǔ)。方法:（1）采用CCK8和EdU試劑盒分別檢測(cè)二甲雙胍對(duì)卵巢癌細(xì)胞的生長(zhǎng)活性和DNA復(fù)制的效應(yīng),以及Transwell法測(cè)定二甲雙胍對(duì)卵巢癌細(xì)胞遷移的效應(yīng)。另外,采用Western blot法檢測(cè)二甲雙胍對(duì)增殖相關(guān)蛋白P21和survivin以及遷移相關(guān)蛋白E-cadherin、Snail和Vimentin表達(dá)的效應(yīng)。（2）利用q RT-PCR技術(shù)檢測(cè)不同濃度的二甲雙胍處理卵巢癌HO8910/SKOV3細(xì)胞中LSD1 m RNA水平,確定二甲雙胍對(duì)LSD1轉(zhuǎn)錄是否有影響。另外,通過(guò)Western blot方法檢測(cè)二甲雙胍對(duì)卵巢癌細(xì)胞中LSD1（組蛋白賴(lài)氨酸特異性去甲基化酶1）蛋白水平的影響,以及對(duì)LSD1去甲基化酶活性的效應(yīng)。（3）利用EGF激活PI3K/AKT通路或用PI3K抑制劑阻斷PI3K/AKT通路,再用二甲雙胍處理,通過(guò)Western blot方... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

LSD1的結(jié)構(gòu)模式圖（A）及FAD依賴(lài)的LSD1去二甲基化圖（B）

二甲雙胍抑制卵巢癌細(xì)胞增殖和遷移的機(jī)理研究人確定了 AR 第二內(nèi)含子中的一種增強(qiáng)子，在 CRPC 的低雄激素水平下促進(jìn) AR 的表達(dá)。此外，在雄激素水平升高時(shí)，AR 結(jié)合該位點(diǎn)并通過(guò)招募 LSD1 抑制 AR 基因表達(dá)，（圖 1.2B）。大量數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，在多種惡性腫瘤細(xì)胞如乳腺癌[77]、神經(jīng)母細(xì)胞瘤[79, 80]、前列腺癌[81]、卵巢癌[82]等腫瘤組織中 LSD1 均為高表達(dá)，且與腫瘤患者的預(yù)后療效呈負(fù)相關(guān)。在肺癌中研究發(fā)現(xiàn) LSD1 高表達(dá)不僅能夠促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、遷移還能增加肺癌細(xì)胞的侵襲能力，進(jìn)一步導(dǎo)致了非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)預(yù)后不良[83]。為了抑制 LSD1 在腫瘤中的促進(jìn)作用，經(jīng)人工合成 LSD1 抑制物 CBB1003 和 CBB1007 在多種惡性生殖細(xì)胞腫瘤中發(fā)揮了明顯的抑制效果，說(shuō)明 LSD1 在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中有著重要的作用[84]。

二甲雙胍抑制卵巢癌細(xì)胞增殖和遷移的機(jī)理研究參與細(xì)胞代謝的信號(hào)調(diào)節(jié)，這些細(xì)胞代謝的信號(hào)調(diào)節(jié)在 PI3K 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以這些相互關(guān)聯(lián)的蛋白為重要靶點(diǎn)。PI3K 信號(hào)通路的異常失控可能是癌鍵點(diǎn)，靶蛋白的異常激活和失活對(duì)癌癥的發(fā)生發(fā)展有著至關(guān)重要的作號(hào)的激活可以促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，是人類(lèi)癌癥的標(biāo)志。


本文編號(hào)：3102571