目的：研究孕激素對(duì)子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞和孕激素耐藥Ishikawa細(xì)胞PI3K/Akt信號(hào)通路的影響,探討孕激素治療子宮內(nèi)膜癌的機(jī)制；研究PI3K/mTOR雙重抑制劑NVP-BEZ235對(duì)子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞及孕激素耐藥Ishikawa細(xì)胞體外增殖能力的抑制作用,探討NVP-BEZ235能否增強(qiáng)孕激素對(duì)Ishikawa細(xì)胞的抑制作用,能否改善或逆轉(zhuǎn)孕激素耐藥Ishikawa細(xì)胞的耐藥性。方法：Western Blot方法檢測(cè)孕激素處理前后Ishikawa細(xì)胞和孕激素耐藥Ishikawa細(xì)胞中Akt蛋白磷酸化水平（p-Akt/Akt）的改變；NVP-BEZ235和醋酸甲地孕酮聯(lián)合應(yīng)用對(duì)Ishikawa細(xì)胞及孕激素耐藥Ishikawa細(xì)胞Akt蛋白磷酸化水平的影響；CCK-8、MTT法檢測(cè)醋酸甲地孕酮單藥或聯(lián)合NVP-BEZ235對(duì)兩株細(xì)胞體外增殖能力的影響；流式細(xì)胞儀檢測(cè)醋酸甲地孕酮單藥或聯(lián)合NVP-BEZ235對(duì)兩株細(xì)胞細(xì)胞周期分布及凋亡情況的影響。結(jié)果：醋酸甲地孕酮作用于子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞可使Akt磷酸化水平下調(diào),藥物作用15min、30min、1h、... 

【文章來(lái)源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：87 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

樣品RNA電泳圖

圖14醋酸甲地孕酮和NVP-BEZ235對(duì)[shikawa和progestin-R Ishikawa細(xì)胞Akt _酸化水平的影響。NVP-BEZ235和醋酸甲地孕酮作用于Ishikawa細(xì)胞（A)和孕激素耐藥丨shikawa細(xì)胞（B)不同時(shí)間后Westernblot方法檢測(cè)pAkt，total Akt和P -actin表達(dá)。*與未用藥物處理時(shí)比較，*P<0.05, **P<0.01。(二）10^lM醋酸甲地孕酮和50nM NVP-BEZ235聯(lián)合作用于子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞及孕激素耐藥Ishikawa細(xì)胞2h、24h后，細(xì)胞內(nèi)Akt磷酸化水平分別與醋酸甲地孕酮單獨(dú)用藥2h、24h后比較（研究第一部分醋酸甲地孕酮作用2h、24h后內(nèi)細(xì)胞Akt憐酸化水平與第二部分兩藥聯(lián)合作用2h、24h后細(xì)胞內(nèi)Akt隣酸化水平進(jìn)行比較）。N VP-BEZ23 5與醋酸甲地孕酮聯(lián)合作用于子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞2h后細(xì)胞內(nèi)Akt磷酸化水平顯著低于醋酸甲地孕酮單獨(dú)用藥（P=0.002)。兩藥聯(lián)合作用于Ishikawa細(xì)胞24h后細(xì)胞內(nèi)Akt磷酸化水平顯著低于醋酸甲地孕酮單獨(dú)用藥（P=0.013)(圖18)。說(shuō)明在Ishikawa細(xì)胞中，NVP-BEZ235顯著增強(qiáng)了孕激素介導(dǎo)的PDK/Akt通路的抑制。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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