研究背景顆粒前體蛋白(progranulin,PGRN)是一種分泌型多功能糖蛋白生長(zhǎng)因子,主要功能是參與炎癥及血管生成過(guò)程,可以調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移、生存及參與腫瘤形成、傷口愈合及神經(jīng)降解性相關(guān)疾病等;PGRN在活體組織的過(guò)度表達(dá)會(huì)影響血管生成;PGRN在早期胚胎發(fā)育以及組織重構(gòu)等方面具有重要功能。目的探討PGRN對(duì)小鼠胚胎及胎盤(pán)血管形成的影響,進(jìn)一步了解PGRN與血管異常而導(dǎo)致的妊娠相關(guān)疾病之間的相關(guān)性,如子癇前期、胎兒生長(zhǎng)受限等。方法收集2017年1-4月在重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院行剖宮產(chǎn)手術(shù)的子癇前期組(10例)以及正常對(duì)照組(12例)的胎盤(pán)組織;通過(guò)PCR及western blot比較子癇前期組和正常對(duì)照組胎盤(pán)組織中PGRN蛋白的表達(dá)情況;通過(guò)免疫熒光以及免疫組化等方式來(lái)對(duì)比在孕6.5天胚胎及孕17.5天胎盤(pán)在PGRN敲除小鼠和正常小鼠血管生成情況;蘇木素-伊紅染色比較孕6.5天子宮動(dòng)脈管徑大小及管壁厚度。結(jié)果PGRN在子癇前期組胎盤(pán)組織中的表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.088,p=0.0176);孕6.5天時(shí),PGRN敲除小鼠的胚胎個(gè)數(shù)較正常對(duì)照明顯減少;在孕早期血管標(biāo)志物SMA蛋白在PGRN敲除小鼠表達(dá)較對(duì)照組減弱;PGRN敲除小鼠子宮動(dòng)脈較正常小鼠子宮動(dòng)脈直徑稍減小,血管肌層厚度減少較明顯;孕17.5天,血管標(biāo)志物Tie2、SMA及COX2蛋白在PGRN敲除小鼠胎盤(pán)迷路層表達(dá)量比正常對(duì)照組減弱。結(jié)論P(yáng)GRN可能通過(guò)參與胚胎發(fā)育和胎盤(pán)的血管形成,在妊娠相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生中起重要作用。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：R714.244
【部分圖文】：

：PCR 和 western blot 檢測(cè) PGRN 在子癇及正常對(duì)照孕婦的表達(dá) protein expression level in pre-eclampsia and health pregnant plaby PCR and Western blot-/-小鼠基因鑒定結(jié)果因敲除小鼠均行基因鑒定，如圖所示，空白組為空白對(duì)照bp 位于條帶 500bp 附近，PGRN-/-小鼠基因 211bp 位于條帶果顯示 PGRN-/-小鼠基因條帶位于 200bp 附近，野生型小鼠近，空白對(duì)照組無(wú)明顯條帶（如圖 2 所示）。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果證均為 PGRN 基因敲除小鼠。

脂糖電泳檢測(cè) PGRN 基因在 PGRN-/-和野生型小鼠gene expression in PGRN-/- and WT mice by agarose影響胚胎數(shù)量取出小鼠子宮可以清楚看見(jiàn)明顯的胚胎植入點(diǎn)鼠和正常對(duì)照組小鼠中的數(shù)量，其中，敲除（如圖 3 所示）。因此，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明 PG

圖 2：瓊脂糖電泳檢測(cè) PGRN 基因在 PGRN-/-和野生型小鼠表達(dá)情況: PGRN gene expression in PGRN-/- and WT mice by agarose electrophN 可能影響胚胎數(shù)量5 天時(shí)，取出小鼠子宮可以清楚看見(jiàn)明顯的胚胎植入點(diǎn)，對(duì)比 敲除組小鼠和正常對(duì)照組小鼠中的數(shù)量，其中，敲除組的植常對(duì)照組（如圖 3 所示）。因此，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明 PGRN 可的數(shù)量。
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本文編號(hào)：2853326